DNA重组技术的基本工具--学案.doc

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1、选修3专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具——学案编者：顾鹏学习目标1．简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。2．认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。学习重点  DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。 学习难点基因工程载体需要具备的条件。学习过程1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）限制性内切酶的来源：主要是从生物中分离纯化来的。（2）常见限制性内切酶的种类：如和。（3）限制性内切酶的作用：能够识别双链DNA分子的某种特定的序列，并能将每一条链上的两个脱氧核糖核苷

2、酸之间的键切开。（3）限制性内切酶的作用特点：具有。（4）限制性内切酶的切割结果：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是。问题探究一：①限制酶所识别的序列有什么特点？②你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？③要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？④如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？例1．右图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是A．CTTAAG，切点在C

3、和T之间B．CTTAAG，切点在G和A之间C．GAATTC，切点在G和A之间D．CTTAAC，切点在C和T之间2．DNA连接酶——“分子缝合针”（1）DNA连接酶作用：把切下来的拼接成新的DNA，即将脱氧核糖和磷酸连接起来。（2）DNA连接酶的种类及功能类型来源功能相同点差别例2．书P-7页“思考与探究”13．基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”问题探究二：①假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？②作为载体没有切割位点将怎样？③目的基因是否进入受体细胞，你如何去察觉？④如果载体对受体细胞有

4、害将怎样？不能分离会怎样？结论：作为运载体必须具备的条件：①在宿主细胞中保存下来并大量复制；②有多个。③有一定的，便于筛选；④对受体细胞无伤害。分子运载车的分类：①质粒：常存在于中，是一种分子质量较小的环状的裸露的分子，独立于拟核之外。②病毒：常用的病毒有、等。问题探究三：质粒为什么可作为运载体？例3．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因

5、的表达提供条件D．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选4．几种酶的比较酶的种类功能作用的部位DNA水解酶DNA解旋酶DNA聚合酶DNA连接酶DNA限制酶例4．依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是A．切断a处的酶为限制核酸性内切酶B．连接a处的酶为DNA连接酶C．切断b处的酶为解旋酶D．连接b处的酶为DNA连接酶切割成末端EcoRI限制酶——学习小结限制酶——切割成末端“刀”——基因工程的基本工具连接酶——连接末端T4DNA连接酶——连接末端“针”——病毒“车”——第1页