生物技术专业英语第课.docx

《生物技术专业英语第课.docx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、Lesson4LIGATION,TRANSFORMATIONANDANALYSISOFRECOMBINANTSDNAligation:T4DNAligaserepairsbreaksinadsDNADNAbackboneandcancovalentlyrejoinannealedcohesiveendsinthereverseofarestrictionenzyme酉毎reaction,tocreatenewDNAmolecules.DNA连接：T4DNA连接酶在双链DNA的分水岭处修复破损的地方，然后在反向限制酶反应中，能共价地再加入退火的粘性末端，从而形成新的DNA分子。Recomb

2、inantDNAmolecules:Theuseofarestrictionenzyme,followedbyDNAligase,cancreaterecombinantplasmids,withatargetDNAfragmentinsertedintoavectorplasmid.重组DNA分子：限制性内切酶的应用，紧随DNA连接酶，能通过将目标片段插入一个人载体质粒形成重组质粒。Alkalinephosphatase:Treatmentofthelinearvectormoleculewithalkalinephosphatasewillremovethe5f-phosphates

3、andrenderthevectorunabletoligateintoacirclewithoutaninsertedtarget,soreducingtheproportionofrecreatedvectorinthemixture・碱性磷酸酶：碱性磷酸酶对线状载体分子的处理是移除5,的磷酸键和会使没带出入目标基因的载体连接成一个环，从而混合物中减少重新形成的载体的比率。ransformation:Transformationistheprocessoftake-upofforeignDNA,normallyplasmids,bybacteria・Plasmidsarecloned

4、bytransferintostrainsofE.coliwithdefinedgeneticproperties・TheE.colicellscanbemadecompetenttotakeupplasmidDNAbytreatmentwithCa2+.Thecellsareplatedoutonagarandgrowntoyieldsinglecolonies,orclones・無换:討换是提取外来DNA的过程，一般是在细菌里的质粒。带有明确遗传特性的质粒是通过转移到大肠杆菌菌株才被克隆的。大肠杆菌细胞能通过的处理提取质粒DNAo细胞被平铺在琼脂上，然后逐渐产出单一的菌落或是克隆体。

5、Selection:Bacteriawhichhavetakenupaplasmidareselectedbygrowthonaplatecontaininganantibiotictowhichtheplasmidvectorencodesresistance.筛选：已经提取了质粒的细菌是通过含有看抗生素的生长培养基选出来的，而这种抗生素是阻碍质粒编码的。Transformationefficiency:Theefficiencyofthetransformationstepisgivenbythenumberofanti-biotic-resistantcoloniespermicr

6、ogramofinputplasmidDNA・转换效率：转换步骤的效率是通过输出质粒DNA每微克抗生素抗性菌落的数量所给定的。Screeningtransformants:Inmanycases,suchaswhenusingDNAlibraries,plasmidandothervectorshavebeendesignedtofacilitatethescreeningoftransformantsforrecombinantplasmids.Inthecaseofasimplesubcloningexperiment,transformantsarescreenedmosteasi

7、lybydigesting消化theDNAfromminipreparationsofthetransformants,followedbyanalysisonanagarosegeL筛选转化株：在许多情况里，如利用DNA文库、质粒和其他载体是已经设计好促进筛选重组质粒的转换株的。在亚克隆实验情况里，转换株通过消化来自转换株的小量准备的DNA最容易被筛选出来，它是紧随琼脂糖凝胶分析的。Growthandstorageoftransf