CTAB缓冲液配制.doc

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1、2%（W/V）CTAB提取缓冲液的经典配方Tris-HCl(pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏；EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性；NaCl提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中；β-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。配方如下：CTAB4gNaCl16.364g1MTris-HCl20ml(PH8.0)0.5MEDTA8ml，先用70mlddH2O溶解,再定容至200ml灭菌冷却后0.2-1%2-巯基乙醇（400ul）氯仿-异戊醇（24：1）：先加96ml氯仿，再加

2、4ml异戊醇，摇匀即可。Tip：Tris-HCl有现成的粉末，也可现配。Tris是一种弱碱，加入HCl后形成Tris盐酸盐，人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，而Tris按一定配比加入盐酸就可作为提取植物中各种蛋白质所用到的缓冲液。TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。TrisBase是未加酸的弱碱