艾滋病、梅毒和乙肝讲稿.ppt

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1、艾滋病、梅毒和乙肝的实验室诊断内江市妇幼保健院副主任检验师项明电话23805791艾滋病、梅毒和乙肝的实验室诊断培训的目的对临床医生：1.检测有哪些方法2.哪个情况下采用什么检测方法最好。对检测人员：1.建立实验室的要求2.检测有哪些方法3.检测的质量控制2梅毒实验室诊断31988-2006年全国梅毒报告发病率和胎传梅毒报告发病率452008年全国梅毒发病地图6梅毒的临床分期一期梅毒：梅毒螺旋体（TP）感染人体后，平均潜伏期3周形成硬下疳（一期皮损），后1~4周血中可测出抗体。二期梅毒：6~8周后，TP

2、经淋巴系统进入血液系统，可引起皮肤粘膜、骨骼、眼等器官及神经系统受损，产生大量抗体。晚期梅毒：感染2年以上，心血管、中枢神经系统受损。78910TP传播TP可经性、血、胎盘而传播妊娠7周时，TP可通过胎盘只是少数患者才出现皮损11梅毒实验室诊断显微镜检查暗视野检查负染色法镀银染色血清学方法非梅毒螺旋体抗原试验VDRL，RPR，USR，TRUST等梅毒螺旋体抗原试验TPPA，FTA-ABS，ELISA12暗视野检查暗视野映光检查采用一个特殊聚光器，其中央为黑漆所遮蔽，光线仅可从四周边缘斜射到载玻片上。若载玻

3、片上有细菌、螺旋体等微粒，由于固体微粒与周围液体折光率不同而引起散射，造成微粒在暗视野下为发光体。13取材方法皮肤粘膜取材：首先在净净的载玻片上放1～2滴生理盐水备用。用棉拭子蘸取无菌生理盐水轻轻擦去皮损上污物，如皮损上有痂皮，可用钝刀轻轻刮去。用手挤压皮损周围，使组织浆渗透出，在其表面用钝刀轻轻刮取数次（避免出血），将渗透液混入载玻片盐水中。加上盖玻片后置显微镜检查。1415161718其它取材方法淋巴结取材羊膜穿刺术19TP镜下形态特征：暗视野下是非常小的纤细的发光体长约6～14um,8～14个规则、

4、紧密的螺旋典型的运动方式：蛇形伸缩式螺旋式20暗视野检查临床意义1.获得性或先天性梅毒的早期进行直接诊断的唯一标准2.当标本阴性时，不能排除梅毒诊断21注意事项取材前，应用无菌等渗盐水清洁皮损表面钝刀要消毒，取材时避免出血。取材后应立即置镜下检查。要观察到螺旋体的形态特征和运动方式，应与其它疏螺旋体相区别。如未观察到TP，并不能完全排除梅毒感染的可能性，应嘱病人复查.。22二、梅毒血清学试验非螺旋体抗原血清学试验：RPR、USR、TRUST、VDRL试验缺点：敏感性稍低，可出现假阳性优点：可观察疗效、出结

5、果快，操作简单。VDRL试验可用于检查神经梅毒23（一）RPR试验TP感染人体后3-4周产生的抗心磷脂抗原的反应素（主要是IgM和IgG抗体）临床意义：疗效观察24步骤在2-6位圆圈各加等渗盐水50l。吸50l血清标本加入第1位为原倍血清，再吸50l血清至第2位，作倍比稀释至1:32或更高。将RPR抗原悬液轻轻摇匀，垂直滴加抗原悬液。置振荡上8分钟，立即在明亮光线下参照对照标准卡用观察结果。25RPR26注意事项在23℃-29℃环境中，抗原悬液4℃保存，试验前恢复至室温。专用针头，垂直加样。应在3分

6、钟内观察结果27临床意义RPR等试验一般认为是梅毒初筛试验，阳性者，均需作确证试验。VDRL用于神经梅毒诊断。有些疾病可导致生物学假阳性。复发或再感染可阳转或滴度升高。为疗效观察、判愈方法。早期梅毒治疗后血清滴度应下降4倍认为治疗有效28(二)梅毒螺旋体抗原血清学试验荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）酶联免疫吸附试验（ELISA）其它29梅毒螺旋体抗原血清学试验优点：特异性高，可作确证，FTA-ABS试验一期梅毒敏感性高，可用于母体梅毒与胎儿梅毒的区别。缺点：不

7、能观察疗效、再感染30梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）向反应板微孔内加血清稀释剂，第1孔100ul,第2，3，4孔各25ul。吸取被检血清25ul至第1孔，反复混匀后，取25ul至第2孔，连续倍比稀释至第4孔，混匀后弃去25ul.向第3孔内滴加未致敏明胶悬液1滴（25ul）。向第4孔内滴加致敏明胶悬液1滴（25ul）。用手轻轻拍击，混匀。将反应板置湿盒内，室温（22℃-29℃）孵育2小时，观察结果。31梅毒螺旋体明胶凝集试32结果判断33注意事项试验在室温（22℃-29℃）环境中进行。用手轻拍、用力均匀

8、，防止孔内液体流出,振荡要充分。未致敏反应孔出现疏散覆盖孔底时，说明阴性对照出错，应寻找错误原因并重作试验。反应孔应清洁，否则影响反应结果观察。34FTA-ABS试验35梅毒确证试验的临床意义RPR：RPR等试验可用于大标本量的筛查？RPR定量可排除生物学假阳性？RPR是疗效判定的指标RPR是疗后随访的指标RPR用于判定是否血清复发TPPA：是金标准TPPA等试验是确诊指标在HIV感染者中，血清学试验可发生难于解释的现象，若怀