实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定.ppt

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1、实验五蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定【实验目的】1.掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。2.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。3.了解卵磷脂水解后的产物,巩固对卵磷脂组成结构的认识。【实验原理】【实验步骤】1.卵磷脂的提取(1)取1个熟的鸡蛋黄,置于研钵中研细,加入15mL95%乙醇溶液,研磨,搅拌均匀。减压过滤,收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内,加15mL95%乙醇溶液,研磨,过滤(滤液应完全透明),将两次滤液合并于蒸发皿内。(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇,至干,得到黄色油状物。(3)冷却后,加入2mL~3mL氯仿,搅拌使油状物溶

2、解。(4)在搅拌下慢慢加入10mL~15mL丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其成团粘附于玻棒上,溶液倒入回收瓶内。2.卵磺脂的水解及其组成鉴定(1)卵磺脂的水解取一支干净试管,加入提取的卵磷脂和5mL10%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热10min,并用玻棒搅拌,使卵磷脂水解。冷却后,在玻璃漏斗中用棉花过滤,得滤液(供以下检查用)。(2)脂肪酸的检查取棉花上沉淀少许,加5mL水,搅拌,有无泡沫生成?过滤,得滤液,以浓硝酸酸化后加入数滴10%醋酸铅溶液,观察有何现象?(3)甘油的检查取小试管一支,加入1滴5%硫酸铜溶液,2滴10%氢氧化钠溶液

3、,振摇,有氢氧化铜沉淀生成。加入水解液,沉淀溶解后,得深蓝色甘油铜溶液。(4)胆碱的检查取1mL滤液,滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊试纸检查),加克劳特试剂1滴,有砖红色沉淀生成。(5)磷酸的检查取一支干净试管,加入10滴滤液和5滴95%乙醇溶液,用硝酸酸化,加1mL钼酸铵试剂,观察有何现象产生?最后直接用火加热5min~10min,观察有无黄色磷钼酸铵沉淀生成?注意事项乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好思考题加丙酮之前为何要加少量的氯仿?

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