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时间:2019-11-13
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1、2019-2020年高中生物第六章蛋白质和DNA技术章末复习提升课中图版选修蛋白质和DNA技术聚丙烯酰胺凝胶的优点聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的电泳方法,其优点如下:1.聚丙烯酰胺没有或很少带有离子的侧基,因而其凝胶电泳作用比较小,不易和样品相互作用。2.可以根据需分离物质的分子大小,选择合适的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的机械性能。3.在一定浓度范围内聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明,易观察,可用检测仪直接测定。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序
2、列两端互补的引物。PCR由高温变性—低温复性—中温延伸三个基本反应步骤构成:1.高温变性:模板DNA经加热至95℃左右,一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解旋,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮循环作准备。2.低温复性:模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。3.中温延伸:DNA模板—引物结合物在耐高温的DNA聚合酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环高
3、温变性—低温复性—中温延伸三个过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又成为下次循环的模板。
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