聚乙烯亚胺溶液配制说明书.pdf

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1、上海起发实验试剂有限公司线性聚乙烯亚胺溶液配制说明书——polysciences#23966,1mg/ml转染试剂的配制转染试剂线性PEI溶液的配制聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。PEI，可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为25000的线性PEI即Polysciences2

2、3966转染效率最高。下面将主要介绍polysciences线性PEI(#23966)的产品特性及其溶液的配制过程。1.产品特性:产品名称：线性聚乙烯亚胺(PEI)CAS号9002-98-6，26913-06-4分子式(CH2CH2NH)n分子量25000熔点73-75°C外观白色或黄色固体结构式溶于热水，低pH值的冷水，甲醇和乙溶解性储存室温醇；不溶于：苯，乙醚和丙酮2.溶液配制此指导说明书是经polysciences公司研究，测试及其客户反馈的后编写的。下面推荐一种简单适用而高效的方法，讲述如何配制浓度为1mg/mL的转染试剂的配

3、制。材料：1g#23966、1L纯水（Milli-Q®纯水，注射用水（WFI），或类似的生物级水）、12M盐酸、10M氢氧化钠、一次性0.1-0.2µmPES真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。器材：1L玻璃烧杯、1L玻璃量筒、核准pH计、2支1mL塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯（PTFE）搅拌棒、真空泵配制过程：1g#23966——900mL水溶解——搅拌、加热（60-80°C）——加HCl调pH到2.0左右——盖上烧杯，搅拌3h（直至粉末完全溶解）——冷却至室温——加NaOH调pH到6.9-7.1——移液到量筒，加水补足至1

4、L——真空过滤消毒——分装，-20°C保存。备注：加热或加酸都有助于PEI溶解。当然酸可能不用加那么多，详细用量可试加一点搅拌看看，足够溶解就行，不一定需要加到pH那么低。试剂储存：冷冻部分溶液可在-20°C保存长达一年；部分解冻的溶液可在4°C保存2周，不可反复冻融。粉末储存：未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。参考文献：1.聚乙烯亚胺（PEI）、线性(1mg/mL).ColdSpringHarborProtocols2008,pdb.rec11323–pdb.rec11323(2008).doi:10.1101/pdb

5、.rec11323.上海起发实验试剂有限公司Catalog#23966–Polyethylenimine,Linear,MW25000(PEI25K)TransfectionReagentPreparationandStorageRecommendationsTheseguidelinesareourrecommendationsbasedoffresearch,testing,andcustomerfeedback.Therearealternativemethodsavailable,butwesuggestfollowingth

6、eserecommendationsforeasyadoptionandconsistentlyhighperformance.ThesemethodsareadaptedfromColdSpringHarborProtocols[1],anexcellentsecondaryresourcefortransienttransfectionliterature.ReagentPreparation(1mg/mL)Materials:1.1gPEI25K(PolysciencesCatalog#23966).2.1LMilli-Q®wa

7、ter,waterforinjection(WFI),orcomparablebiological-gradewater3.12MHydrochloricAcid(HCl)4.10MSodiumHydrochloride(NaOH)5.Disposable0.1-0.2µmPESvacuumsterile-filter.6.SterileHDPEorpolypropylenestoragevialsforreagentaliquots.Equipment1.1Lglassbeaker2.1Lglassgraduatedcylinder

8、3.CalibratedpHmeter4.2xdisposable1mLplasticpipettes5.Stirplate6.PTFEcoatedstirbar7.VacuumpumpMethod:1.Dispense