BIO-RAD双向电泳中文手册.pdf

《BIO-RAD双向电泳中文手册.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ProteomicsBio-Rad蛋白质组双向电泳实验操作手册TMProteomeWorksSystem1双向电泳实验流程ò样品制备（Samplepreparation）ò固相预制胶条的水化（IPGstriprehydration）ò第一向等电聚焦（IEF）ò胶条的平衡（IPGstripequilibration）ò第二向SDS-PAGE电泳（SDS-PAGEelectrophresis）ò凝胶的染色及检测（Detection/Staining）òPDQuest软件分析（Softwareanalysis）ò质

2、谱鉴定（Proteinidentification）2目录第一章实验材料1．1IPG预制胶条及载体两性电解质1．2蛋白质定量试剂盒及其试剂1．3试剂盒及其试剂1．4化学试剂1．5蛋白质Marker1．6染色试剂1．7注意事项第二章SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳2.1溶液的配制2.2SDS-PAGE凝胶的配制2.3操作方法2.4注意事项第三章双向电泳3.1溶液配制3.2操作步骤3.3注意事项附录1双向电泳完整的操作步骤附录2聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置附录3细胞样品的一般处理步骤附录4组织样品的一般处理步骤

3、3第一章实验材料1．1IPG预制胶条及载体两性电解质（一）IPG预制胶条（美国Bio-Rad公司），-20℃冰箱保存IPG预制胶条pH3-10，7cm163-2000IPG预制胶条pH3-10，7cm，nonlinear（NL）163-2002IPG预制胶条pH4-7，7cm163-2001IPG预制胶条pH3-6，7cm163-2003IPG预制胶条pH5-8，7cm163-2004IPG预制胶条pH7-10，7cm163-2005IPG预制胶条pH3-10，17cm163-2007IPG预制胶条pH3-1

4、0，17cm，nonlinear（NL）163-2009IPG预制胶条pH4-7，17cm163-2008IPG预制胶条pH3-6，17cm163-2010IPG预制胶条pH5-8，17cm163-2011IPG预制胶条pH7-10，17cm163-2012IPG预制胶条pH3-10，18cm163-2032IPG预制胶条pH3-10，18cm，nonlinear（NL）163-2033IPG预制胶条pH4-7，18cm163-2034IPG预制胶条pH3-6，18cm163-2035IPG预制胶条pH5-8

5、，18cm163-2036IPG预制胶条pH7-10，18cm163-2037IPG预制胶条pH3-10，11cm163-2014IPG预制胶条pH3-10，11cm，nonlinear（NL）163-2016IPG预制胶条pH4-7，11cm163-2015IPG预制胶条pH3-6，11cm163-2017IPG预制胶条pH5-8，11cm163-2018IPG预制胶条pH7-10，11cm163-2019IPG预制胶条pH3.9-5.1，17cm163-2020IPG预制胶条pH4.7-5.9，17cm1

6、63-2021IPG预制胶条pH5.5-6.7，17cm163-2022IPG预制胶条pH6.3-8.3，17cm163-20234IPG预制胶条pH3.9-5.1，18cm163-2038IPG预制胶条pH4.7-5.9，18cm163-2039IPG预制胶条pH5.5-6.7，18cm163-2040IPG预制胶条pH6.3-8.3，18cm163-2041IPG预制胶条pH3.9-5.1，11cm163-2024IPG预制胶条pH4.7-5.9，11cm163-2025IPG预制胶条pH5.5-6.7，

7、11cm163-2026IPG预制胶条pH6.3-8.3，11cm163-2027IPG预制胶条pH3.9-5.1，7cm163-2028IPG预制胶条pH4.7-5.9，7cm163-2029IPG预制胶条pH5.5-6.7，7cm163-2030IPG预制胶条pH6.3-8.3，7cm163-2031（二）载体两性电解质（美国Bio-Rad公司），4℃冰箱保存Bio-Lyte3/10Ampholyte，40%，10ml163-1112Bio-Lyte3/10Ampholyte，40%，25ml163-11

8、13Bio-Lyte3/5Ampholyte，20%，10ml163-1132Bio-Lyte4/6Ampholyte，40%，10ml163-1142Bio-Lyte4/6Ampholyte，40%，25ml163-1143Bio-Lyte5/7Ampholyte，40%，10ml163-1152Bio-Lyte5/7Ampholyte，40%，25ml163-1153Bio-Lyte6/8Amp