BIO-RAD双向电泳中文手册.pdf

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1、ProteomicsBio-Rad蛋白质组双向电泳实验操作手册TMProteomeWorksSystem1双向电泳实验流程ò样品制备(Samplepreparation)ò固相预制胶条的水化(IPGstriprehydration)ò第一向等电聚焦(IEF)ò胶条的平衡(IPGstripequilibration)ò第二向SDS-PAGE电泳(SDS-PAGEelectrophresis)ò凝胶的染色及检测(Detection/Staining)òPDQuest软件分析(Softwareanalysis)ò质

2、谱鉴定(Proteinidentification)2目录第一章实验材料1.1IPG预制胶条及载体两性电解质1.2蛋白质定量试剂盒及其试剂1.3试剂盒及其试剂1.4化学试剂1.5蛋白质Marker1.6染色试剂1.7注意事项第二章SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳2.1溶液的配制2.2SDS-PAGE凝胶的配制2.3操作方法2.4注意事项第三章双向电泳3.1溶液配制3.2操作步骤3.3注意事项附录1双向电泳完整的操作步骤附录2聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置附录3细胞样品的一般处理步骤附录4组织样品的一般处理步骤

3、3第一章实验材料1.1IPG预制胶条及载体两性电解质(一)IPG预制胶条(美国Bio-Rad公司),-20℃冰箱保存IPG预制胶条pH3-10,7cm163-2000IPG预制胶条pH3-10,7cm,nonlinear(NL)163-2002IPG预制胶条pH4-7,7cm163-2001IPG预制胶条pH3-6,7cm163-2003IPG预制胶条pH5-8,7cm163-2004IPG预制胶条pH7-10,7cm163-2005IPG预制胶条pH3-10,17cm163-2007IPG预制胶条pH3-1

4、0,17cm,nonlinear(NL)163-2009IPG预制胶条pH4-7,17cm163-2008IPG预制胶条pH3-6,17cm163-2010IPG预制胶条pH5-8,17cm163-2011IPG预制胶条pH7-10,17cm163-2012IPG预制胶条pH3-10,18cm163-2032IPG预制胶条pH3-10,18cm,nonlinear(NL)163-2033IPG预制胶条pH4-7,18cm163-2034IPG预制胶条pH3-6,18cm163-2035IPG预制胶条pH5-8

5、,18cm163-2036IPG预制胶条pH7-10,18cm163-2037IPG预制胶条pH3-10,11cm163-2014IPG预制胶条pH3-10,11cm,nonlinear(NL)163-2016IPG预制胶条pH4-7,11cm163-2015IPG预制胶条pH3-6,11cm163-2017IPG预制胶条pH5-8,11cm163-2018IPG预制胶条pH7-10,11cm163-2019IPG预制胶条pH3.9-5.1,17cm163-2020IPG预制胶条pH4.7-5.9,17cm1

6、63-2021IPG预制胶条pH5.5-6.7,17cm163-2022IPG预制胶条pH6.3-8.3,17cm163-20234IPG预制胶条pH3.9-5.1,18cm163-2038IPG预制胶条pH4.7-5.9,18cm163-2039IPG预制胶条pH5.5-6.7,18cm163-2040IPG预制胶条pH6.3-8.3,18cm163-2041IPG预制胶条pH3.9-5.1,11cm163-2024IPG预制胶条pH4.7-5.9,11cm163-2025IPG预制胶条pH5.5-6.7,

7、11cm163-2026IPG预制胶条pH6.3-8.3,11cm163-2027IPG预制胶条pH3.9-5.1,7cm163-2028IPG预制胶条pH4.7-5.9,7cm163-2029IPG预制胶条pH5.5-6.7,7cm163-2030IPG预制胶条pH6.3-8.3,7cm163-2031(二)载体两性电解质(美国Bio-Rad公司),4℃冰箱保存Bio-Lyte3/10Ampholyte,40%,10ml163-1112Bio-Lyte3/10Ampholyte,40%,25ml163-11

8、13Bio-Lyte3/5Ampholyte,20%,10ml163-1132Bio-Lyte4/6Ampholyte,40%,10ml163-1142Bio-Lyte4/6Ampholyte,40%,25ml163-1143Bio-Lyte5/7Ampholyte,40%,10ml163-1152Bio-Lyte5/7Ampholyte,40%,25ml163-1153Bio-Lyte6/8Amp

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