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时间:2019-11-05
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1、PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是总结: 母液的配制: 0.2MNa2HPO4:称取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:称取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需将0.2MPB(pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加
2、水稀释至1000ml即可。0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀释至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀释至1000ml即可。 若需要NaCl的话,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。 另:其它各种另PH值的0.2MPB(100ml)配方:pH 0.2MNaH2PO4(ml) 0.2MNa2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92 85.9 90 106.
3、0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0
4、 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19 817.5 16 847.6 13 877.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3
5、94.70.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭
6、菌消毒。PBS是磷酸缓冲液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释,原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。文献查得:磷酸缓冲液(PBS):NaCl8.0g,KH2PO40.2g,Na2HPO42.9g
7、,KCl0.2g,重蒸水1000mL,调pH至7.4。
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