现代生物技术在动物药分离研究中的应用

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1、现代生物技术在动物药分离研究中的应用陈毓（江苏畜牧兽医职业技术学院药学系，江苏泰州225300）摘要：动物药是我国医药宝库的重要组成部分，在临床有着广泛的应用，但动物药基础研究薄弱,研究人才匮乏，导致动物药研究发展缓慢。如何借鉴现代科学技术找到适合动物药研究的新方法和新模式，是动物药发展的关键所在。本文通过查阅文献，综述了现代生物技术如色谱分离技术、电泳技术、蛋白组学技术、DNA分子标记、生物芯片、免疫技术等在动物药化学成分分离、鉴别、质量评价等研究中的应用，以期为动物药研究提供参考。关键词：生

2、物技术；动物药；分离动物药是我国医药宝库的重要组成部分，是中药三大来源之一，由于其活性强、资源广、疗效高而备受历代医药学家的重视和青睐，祖国医药学应用动物药防治疾病具有悠久的历史。为了解动物药在《中国药典》中的收载情况，查阅并统计了1990年至2010年二十年间我国出版的5版药典，结果见表1。结果可以看出，每版药典所收载的动物药药材及其制剂的比例变化不大，收载的动物药药材约占总收录药材和饮片的平均比例为8.9%，含动物药的制剂占单味及成方制剂总和的比例为32.0%。药典中收载的动物药药材比例只有

3、十分之一，但在制剂中的使用比例却达到了三分之一，可见动物药在临床实际应用中还是比较广泛的。但近些年以来，动物药基础研究薄弱,研究人才匮乏，导致动物药的研究发展缓慢。因此，有必要进一步加强对动物药的研究和开发。表11990~2010年《中国药典》中动物药药材及其制剂收载情况序号版本（年版）药材+饮片（味）动物药（味）比例（%）单味及成方制剂（种）含动物药制剂（种）比例（%）12010616538.686931235.922005553519.257016529.032000534478.84581

4、5333.441995517428.1398　12130.451990509499.6275　8731.6动物药研究起步较晚，其系统研究整理工作始于20世纪60年代，基础薄弱，存在较多空白，加之传统动物药研究理论不完善，符合动物药研究特色的方法学尚未建立，如何合理有效的借鉴现代技术手段也不明确[1]。动物药传统研究思路是以中医理论为指导，重点研究临床应用等相关方面，主要包括:本草考证、资源调查、基源鉴定、动物药化学、加工炮制、药效研究、品质评价等[2]，而动物药基础理论研究相对较少，如动物药成分

5、分离纯化研究、效应物质基础研究、药效机理研究、代谢动力学研究等。动物药研究是中药研究领域特有的分支，是具有独特体系的学科，其药用部位为动物的器官、组织或代谢产物，来源、组成、成分与植物药大相径庭，因此采用目前相对较成熟的植物药研究思路去探索动物药的道路是很难走通的。尽管如此，随着生物领域技术的发展，现代生物技术已逐渐广泛应用于动物药化学成分分离、鉴别、质量评价等研究领域，并取得了可喜的进展。1　生化分离技术动物药中除了含有氨基酸、核酸、甾醇、生物碱等小分子物质外，还含有大量与生命活动密切相关的蛋

6、白质、多肽、酶等成分，常用动物药中的蛋白质和多肽类成分具有抗凝抗血栓、抗肿瘤、抗炎、免疫调节等功效[3]，这些成分可能正是动物药主要物质基础所在。对于中药动物药的分离纯化方法，不能采用传统中药植物药的研究方法，而应将现代生化分离技术引入动物药的研究，并加以充分利用。生化分离技术主要包括:色谱分离、电泳分离、沉淀分离、膜分离等技术。1.1　色谱分离技术色谱分离技术包括凝胶过滤色谱、离子交换色谱、反相色谱、亲和色谱等。对于生物大分子的分离，只使用单一的色谱方法很难将待分离物质完全分离，通常将几种原理

7、不同的色谱技术组合起来以获得理想的纯化效果。Cao等[4]利用凝胶过滤、离子交换、制备型反相色谱法从东亚钳蝎蝎毒中分离纯化了Mar-tentoxinI、Martentoxin、BmKAngM1等多肽。Zhen等[5]利用丙酮分级沉淀、超滤、凝胶过滤色谱等方法从鲨鱼软骨中分离纯化得到一种新型抗血管生成多肽。Guan等[6]利用阳离子交换、凝胶过滤色谱从梅花鹿茸中分离得到具有抗肝纤维化作用的新型多肽。魏金荣等[7]采用一步亲和色谱法分离纯化了白眉蝮蛇蛇毒中的降纤酶，得到的降纤酶纯度高达99%以上。1

8、.2　电泳技术电泳技术是一种广泛使用的蛋白质和核酸分离分析技术。凝胶电泳是一种杰出的分析手段,是蛋白质纯化过程中重要的监测手段。通过电泳可以准确简便的比较大量样品,并获得蛋白质图谱。将两种基于不同分离原理的电泳方法进行组合能大大提高分离效果,如双向电泳。目前电泳技术已经广泛应用于动物药的鉴定研究。利用动物药药材中的不同组分具有不同的电荷特性,在同一电场下泳动距离存在差异而实现鉴定。史克莉等[8]利用SDS-PAGE技术对3种蜂王浆、牛血清蛋白、金钱白花蛇、乌梢蛇、鹿蹄筋、炮制前后的蝎子进行了鉴别