实验二抑制剂对酶促反应速度的影响 (1)

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1、实验二抑制剂对酶促反应速度的影响EffectsofInhibitorsontheVelocityofEnzymaticReactions一、实验原理凡能降低酶活性甚至使酶丧失活性的物质，称为酶的抑制剂。酶的特异性抑制剂可分为可逆性和不可逆性两类。可逆性抑制剂又可分为竞争性和非竞争性两类。竞争性抑制剂的作用特点是该酶的Km值增大，但最大的反应速率不变，而非竞争性抑制剂的作用特点是不影响底物与酶结合，故其Km值不变，而能降低其最大反应速度。本实验中观察无机磷酸盐对碱性磷酸酶的抑制作用，用磷酸苯二钠法测酶活性，使各管底物浓度不同，其他条件相同，除各管都加有同样量Na2HPO4外，实验操作完全同前

2、一实验。计算结果，画出曲线，判定Na2HPO4对碱性磷酸酶的影响。二、实验操作管号123456SB0.04mol/L基质液（mL）0.100.200.300.400.801.00水（mL）1.301.201.101.000.600.401.501.400.04mol/LNa2HPO4(mL)0.100.100.100.100.100.10—0.10碳酸盐缓冲液含（AAP）(mL)1.501.501.501.501.501.501.501.50摇匀，37℃保温5min酶液（mL）0.100.100.100.100.100.10—0.10酚标准应用液（mL）——————0.10—充分摇匀，37

3、℃准确保温15min0.5%铁氰化钾（mL）2.002.002.002.002.002.002.002.00充分摇匀，室温放置10min在510nm，以B管调零时读取各管光密度值。计算并作图要领同实验一，求出Km值，判定结果，Na2HPO4属于哪种抑制剂。三、思考题联系实验结果，讨论抑制剂对酶活性的影响。四、英语关键词最大反应速度：Maximumvelocity米—曼式方程：Michaelis—MentenEquation特性常数：Characteristicconstant绘图：Plot直线：StraightLine截距：Intercept斜率：Slope磷酸苯二钠：DisodiumPh

4、enylphosphate4-氨基安替比林：4-Aminoantipyrine