2019高考生物二轮复习 专题八 生物技术实践限时规范训练

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1、专题八生物技术实践[限时规范训练]练思维练规范练就考场满分1．为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。(1)为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是________。制备的培养基常用________法进行灭菌。K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4琼脂0.1g0.5g3g0.01g2g15g加至1L(2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，振荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行__________，用________

2、__法接种于固体培养基上。接种后的培养基__________状态放入培养箱。(3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。(4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将________________与等量果胶

3、溶液混合，作为实验的对照。答案：(1)果胶和蒸馏水高压蒸汽灭菌(2)梯度稀释(或系列稀释)(稀释)涂布平板倒置(3)水解(或透明)圈(4)上清液等量失活的粗提果胶酶2．(2018·山西太原模拟)在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答：(1)液体培养基中除了把葡萄糖作为________外，还应该含有___

4、____________________。(2)样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的、培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：________________________。请再设计并完成下列实验，来验证你的观点。①配制________________的固体培养基(A组)和不含碳源的固体培养基(B组)。②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段

5、时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在________条件下进行。③预期实验结果：____________________________________________________________。解析：(1)根据题意，微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要，因此该培养基一定为液体培养基；液体培养基的基本营养成分为碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，其中葡萄糖为碳源。(2)由题意知，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是

6、醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的、培养过CV103的培养基中生长，据此可以推测CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源。答案：(1)碳源氮源、水、无机盐、特殊营养物质(生长因子)(2)CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源①以醋酸盐为唯一碳源②无菌(或适宜的温度等)③A组菌株生长(形成菌落)，B组菌株不能生长(无菌落)3．三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素，但该菌株的高产性状容易退化，需要定期筛选出高产菌株，研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物，且菌体

7、细胞内[H]含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。请结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图回答问题：三孢布拉霉菌液→梯度稀释→涂布到含有TTC的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→鉴定(1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种，除可利用上述微生物的发酵生产之外，还可以从植物中提取和从________中获取。(2)将菌液涂布到含TTC的培养基上，目的是筛选出________________，对照组需涂布等量的________以判断培养基是否被污染。挑取单菌落时，若菌落周围_

8、_______，则菌株合成胡萝卜素的能力较强。(3)从该微生物中提取胡萝卜素时，扩大培养后要收集菌丝进行的处理是粉碎和________，以提高萃取效率。萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是防止______________。(4)鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用________法，该方法也可用于分离色素，其原理是______________________________________________________