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《福尔马林固定大黄鱼的DNA提取方法的探索【开题报告+文献综述+毕业设计】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、本科毕业论文系列开题报告水产养殖福尔马林固定大黄鱼的DNA提取一、选题的背景与意义分子系统学的研究首先必须获取足够含有遗传信息的生物样品,既包含有核酸、蛋白质的样本.但在实际工作中有时要获得足够样品非常困难,如对于种群小、濒危、分布区窄的动物来说,采集标本的成功率较低.如何从馆藏标本中获取需要分析的遗传样品,成为了分子系统学研究探索的途径.首先,馆藏标本由于多年的积累,收藏标本齐全,花费较小的人力、物力就可获得分子系统学研究样品;其次,减少了对现有动物的干扰,对于珍稀动物这点尤为重要;第三,通过馆藏标本的研究,排除了由于遗传物质转移、物种迁移等形成的系统分析的混乱.并且
2、从标本的类型来说,模式标本、地模标本等在系统学研究中的作用有很大差别,前者更具有说服力.所以,如能从馆藏标本中直接获得实验样品,将极大的有利于动物系统学的研究.核酸的分离与纯化是分子生物学研究中重要的技术,现有的DNA提取与纯化方法一般只适用于新鲜材料,虽然对于一些较为特殊材料的DNA提取已提出一些专一方法,但是对于福尔马林长期保存生物标本基因组DNA的提取至今未能彻底解决。作为生物标本的保存液,福尔马林的优点在于渗透力强、防腐杀菌效果好、固定速度快,具有能快速杀死生物细胞以固定生物大分子的功能。因此在过去的若干年中,世界各国生物学家采集了大量生物标本并保存于福尔马林中
3、,这些标本在研究物种起源、系统进化、特定物种基因资源保护以及生物多样性等方面具有很高的学术研究价值。如不能正常提取基因组总DNA,就会给从分子水平上比较研究这类生物带来障碍。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题:研究的基本内容:福尔马林固定大黄鱼的DNA提取方法的探讨拟解决的问题:如何从福尔马林固定的大黄鱼体内取得可以用于遗传分析的DNA;如何提高提取的DNA质量;如何简化提取过程。三、研究的方法与技术路线:(一)研究方法尝试用几种不同的方法来提取DNA后进行PCR扩增,然后分别用紫外分光光度仪和80%琼脂糖凝胶电泳监测DNA质量。依次来筛选简单有效地提取方法。尝试着改
4、进实验措施,主要从材料准备、预处理和提取3个方面进行改进。(二)技术路线四、研究的总体安排与进度2010.1~2010.2毕业论文选题2010.2~2010.3进行文献查阅和资料收集,制定具体研究计划和试验方案。2010.3~2010.4实验材料准备2010.4开题报告2010.9~2010.10进行DNA提取实验2010.11~2010.12完成2篇外文翻译,论文撰写、提交并答辩五、主要参考文献:[1]徐来祥,张知彬,宋铭晶,等.福尔马林保存的动物标本基因组DNA的提取方法[J].动物学报,2002,48(2):264~269.[2]刘娟.固定标本DNA提取方法优化的
5、研究.赤峰学院学报,2007,23(4):18~19.[3]杜世章,陈立桥.从动物固定标本中提取DNA方法研究.四川大学学报,2004,41(4):893~895.[4]杨钟,朱滨,常剑波.福尔马林固定白鲟(Psephurusglad/us)标本的DNA提取及其相近种微卫星引物的适用性.湖泊科学,2008,20(2):242~250.[5]许黎美,万秋红,王丁.福尔马林固定白暨豚标本DNA提取及其遗传多样性的初步研究.水生生物学报,2005,29(3):272~278.[6]GoelzSE,HamiltonSR,VogelsteinB.PurificationofDNA
6、formaldehydefixedandparaffinembeddedhumantissue[J].BiochemBiophysRescommun,1985,130:118~126.[7]DubeauL,ChandlerLA,GralowJR,etal.SouthernblotanalysisofDNAextractedfromformalin-fixedpathologyspecimens[J].CancerRes,1986,46:2964~2969.[8]CoombsNJ,GoughAC,PrimroseJN.OptimizationofDNAandRNAextr
7、actionfromarchivalformalin-fixedtissue[J].NucleicAcidsRes,1999,27:e12.[9]PoljakM,SemeK,GaleN.RapidextractionofDNAfromarchivalclinicalspecimens:ourexperiences[J].PflügersArch-EurJPhysiol,2000,439[Suppl]:R42~R44.[10]夏颖哲,盛岩,陈宜瑜.福尔马林对固定标本DNA提取和扩增的影响.四川动物,2006,25(3):662~665.[1