山西大学细胞生物学实验论文

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1、细胞生物学实验论文外来化合物对细胞生理代谢的影响—急性ZnCl2染毒对小麦幼苗茎叶组织SOD活力的影响指导教师：张小民李翠兰学院：生命科学专业：生物科学姓名：王兴通学号：2011312029摘要：本实验以急性ZnCl2和小麦幼苗为实验材料，研究了不同浓度(ZnCl2的浓度分别是100mg/mL、200mg/mL、400mg/mL、800mg/mL、1600mg/mL)对小麦幼苗生理活性的影响，初步阐明了Zn+2对小麦幼苗的毒害机理。结果表明，结果以浓度400mg/mL处理最佳,能够显著促进小麦根系的生长,

2、根长、根重和根系活力分别比对照显著提高。在Zn+2胁迫下，随处理浓度的升高，小麦幼苗叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性呈上下波动的趋势。通过对各组SOD值的分析可知，浓度小于100mg/L的Zn+2促进SOD同工酶的表达，浓度大于800mg/L的Zn+2抑制SOD同工酶的表达，中间浓度呈波动性影响，低浓度的ZnCl2可诱导小麦幼苗SOD的表达，而高浓度的ZnCl2会抑制SOD的活性。关键词：外来化合物；ZnCl2；小麦幼苗组织；SOD酶活性1.材料与方法1.1实验材料1.1.1材料：小麦幼苗:实验室固体培

3、养基中培养1.1.2试剂：0.05mol/lPBS缓冲液（PH7.0）SOD试剂盒冰醋酸5个不同浓度ZnCl2溶液（100mg/l200mg/l400mg/l800mg/l1600mg/l）1.1.3器材：离心机分光光度计天平恒温水浴锅冰浴微量移液器（100ul50ul）研钵离心管一次性塑料管1.2实验方法1.2.1ZnCl2染毒处理实验及粗酶提取液的制备浸种5-6h，萌发24-36h后将露白的种子随机摆放于培养皿中，30-40粒/皿左右，生长7天后，分别用不同浓度的ZnCl2溶液处理9天后，取茎叶0.2

4、-0.3g，按1:20加入遇冷的PBS液（1/3用于研磨，2/3用于清洗，小范围研磨，便于冲洗），冰浴研磨，倒入离心管，并用剩余的PBS液冲洗入离心管。8000rpm离心15min，上清液即为5%的粗酶提取液，用于SOD酶活性的测定。1.2.2总SOD酶活力测定（按下表进行）试剂测定管（4个）对照管（1个）SOD试剂11ml1ml粗酶提取液40ul--蒸馏水--40ulSOD试剂20.1ml0.1mlSOD试剂30.1ml0.1mlSOD试剂40.1ml0.1ml充分摇匀，置37℃水浴40min显色剂2m

5、l2ml混匀，室温放置10min，于波长550nm处，1cm光径比色杯，蒸馏水调零，比色，测定各管OD值。2.结果与分析注：1%的粗酶提取液稀释倍数为100倍/g2.1不同浓度Zncl2溶液处理小麦茎叶总SOD酶活性Zncl2浓度（mg/L）各重复的总SOD酶活力总SOD平均值±标准差12340（对照）19382250214122162136.2500±139.7912120021102442190619142093.0000±251.0644040030883094264332283013.2500±2

6、55.1540480021093133263128772687.5000±436.74363160019662254261925582349.2500±301.27216由表可知，当Zncl2浓度为200mg/L时，与对照组相比，SOD酶的活性增加，当Zncl2浓度为400mg/L,800mg/L和1600mg/L时，与对照组相比，SOD酶的活性减小。2.2不同浓度Zncl2溶液处理组之间SOD酶活的t-检验P值P0mg/L200mg/L400mg/L800mg/L2001.000———4000.007*

7、*0.005**——8000.1780.1171.000—16001.0001.0000.0591.000说明：当P>0.05时，差异不显著，P<0.05时,差异显著，用“*”表示。P<0.01时，差异极显著，用“**”表示。由表可知:Zncl2浓度为200mg/L与Zncl2浓度400mg/L相比，SOD酶活的差异极显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响差异极大。Zncl2浓度为200mg/L与Zncl2浓度800mg/L相比时，SOD酶活的差异不显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响不明显。Z

8、ncl2浓度为200mg/L与Zncl2浓度1600mg/L相比，SOD酶活的差异显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响较明显。Zncl2浓度为400mg/L与Zncl2浓度800mg/L相比，SOD酶活差异不显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响不明显。Zncl2浓度为400mg/L与Zncl2浓度1600mg/L相比，SOD酶活差异不显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响不明显。Zncl2浓度为800mg/L与