实验7 血液凝固和影响血液凝固的因素

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1、实验7血液凝固和影响血液凝固的因素第二临床医学院临床专业【摘要】目的通过测定某些条件下的血液凝固时间，加深理解影响血液凝固的因素方法往加了生理盐水、肺组织浸液、棉花、石蜡、肝素、草酸钾和放在室温、冰块里的8支试管里加等量的家兔血液，分别记录凝血时间。结果血液凝固的顺序分别为加了棉花的试管，肺组织浸液的试管，生理盐水的试管，室温的试管，涂了了石蜡的试管，放在冰块里，加了肝素和草酸钾的血液在一个小时内未见凝血现象。结论棉花、肺组织浸液、生理盐水有促进血液凝固的作用，石蜡有微弱的抗凝作用，肝素、草酸钾、低温有很强的抗凝作用。并且外源性凝血时间比内源性凝血时间短

2、。【实验对象】家兔体重适宜，雌雄不限，【材料】石蜡油，冰块，肝素，草酸钾，氨基甲酸乙脂；试管，动脉夹，动脉插管，秒表。【方法】1.用200g/L氨基甲酸乙脂按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将兔固定于兔手术台上。2.切开颈部皮肤后，分离颈外动脉，采血10ml,制备血浆和血清。3.分离一侧颈总动脉，头端用线结扎，向心端夹上动脉夹。用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”行小口，向心方向插入动脉插管，用线结扎固定。以备取血之用。4.取8支试管，编号。试管编号实验条件每管加血2ml1对照管（无添加）2棉花少许3石蜡油涂管内壁4冰块5草酸钾0.1ml6

3、生理盐水3ml7肺组织0.1ml8肝素1ml小烧杯放血20ml放血时用竹签不断搅动，3～5分钟后用水冲洗竹签后观察之小烧杯放血20ml对照5.取8支试管，编号，分别按下表1.中的要求准备试管、准备手表记血液凝固的时间。血液刚进入各试管时同时计时间，每管2ml，每隔15s，将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状时，记下所历时间。5~83管加入血液后，用指腹盖住试管口将试管颠倒两次，使之混匀。6.实验观察记录各管的凝血时间【结果】表1凝血时间编号实验条件凝血时间1对照管（无添加）10mis2棉花少许1.5min3石蜡油涂管内壁47min20s4冰

4、块不凝5草酸钾0.1ml不凝6生理盐水3ml22min7肺组织浸液0.1ml40s8肝素1ml不凝表28组实验原始数据组别空白试管凝血时间肺组织试管凝血时间112’20”3’50”229’50”3’05”328’04”2’10”435’00”2’55”537’10”2’10”610’00”40”712’00”2’00”827’35”3’20”表3肺组织对凝血时间的影响组别n凝血时间（t）1号管（空白）8x+s=24+10.917号管（肺组织）8x+s=2.5+0.99**P=0.000819<0.01【分析】1.1号试管及其他试管内血液凝固，是因为血液与

5、试管壁接触，启动了内源性凝血过程。2.血液凝固时间2号试管（棉花）<1号试管，血液接触到光滑的表面，阻碍因子激活，阻碍内源性凝血，凝血减慢。3.血液凝固时间3号试管（均匀石蜡）>1号试管，血液接触到粗糙的表面，促进因子激活，促进内源性凝血，凝血加速。4.血液凝固时间4号试管（冰水）>1号试管，酶的活性随着温度的不同而不同，冰水降低了血液中凝血酶的活性，使凝血过程减慢。5.血液凝固时间5号试管（草酸钾）>1号试管，原因是草酸钾是抗凝剂与血液中Ca+结合生成草酸钙沉淀，减少了Ca2+，抑制了凝血过程。6.血液凝固时间6号试管(生理盐水)<1号试管。研究发现血

6、液稀释后凝血功能与血液稀释程度相关,生理盐水占20%加快了血液凝固的进程,30%、40%稀释的凝血功能未受影响,50%稀释的血液凝固能力开始减弱,60%稀释的血液凝固能力受到严重影响。其可能的原因：①3血液稀释破坏了凝血酶与抗凝血酶的动态平衡,相较于凝血酶而言,抗凝血酶的活性更容易受到血液稀释的影响,因此产生了高凝状态②有学者则通过体内实验得出推论,认为是凝血酶原的激活增加促成了高凝状态。而30%、40%稀释度组的各项指标与对照组没有显著性差异,可以推测是在凝血酶原、纤维蛋白原以及血小板的浓度稀释与功能增强之间达到了一种动态平衡。当稀释度达到50%,甚至

7、是60%的时候,由于某一种或是多种凝血有效成分的功能增强已不足以代偿其浓度稀释的影响,就会导致凝血功能整体性的下降,进入失代偿期。7.血液凝固时间7号试管（肺组织浸液）<1号试管，肺组织浸液含组织因子，组织因子FⅢ启动了外源性凝血过程，加速了血液凝固过程。8.血液凝固时间8号试管(肝素)>1号试管，是因为肝素是抗凝剂，主要通过以下机制增长了血液凝固时间2：①增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力，加速凝血酶的失活；②抑制血小板的粘附、聚集。【讨论】血液凝固过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。根据血液凝固过程中凝血酶原激活途径不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和

8、外源性激活途径。内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中；外源性凝血