生物样品2010.ppt成都

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1、生物样品检测技术中国疾病预防控制中心陶雪概述生物样品的采集和保存生物样品检测方法生物监测质量保证规范一、概述生物样品定义机体的体液、分泌物、排泄物以及脏器组织等,如血液、唾液、乳液、泪液、汗液、粪便、尿液、头发、指甲等。生物样品测定的意义反映人体接触毒物的水平了解毒物在体内的吸收、分布、生物转化和排除情况为职业病的临床诊断和药物疗效提供可靠的依据制定生物样品中有毒物质的生物接触限值提供科学依据生物样品测定的内容测定生物样品中有毒物质的含量测定有毒物质的代谢产物测定生物样品中毒物引起生化指标的改变测定生物样品中酶学指标生物样品的本底值定义生物样品的本底值也称参比值,是指

2、有些生物监测指标在不接触职业毒物的健康人群,也可检测到的一定水平。制定生物样品本底值的意义1.是劳动卫生检验和职业病防治、诊断研究的基本资料。2.评价环境污染水平3.了解职业者接触有毒物质的程度,评价工作场所的污染情况。4.为制定卫生标准,制定生物接触限值提供科学的依据。制定生物样品本底值的基本要求1.确定分析方法:首选标准的或统一的分析方法。否则,应根据分析方法制定程序(程序包括测定条件、标准曲线、检测限、精密度、准确度、干扰实验、样品的稳定性)选择分析方法。2.测定对象的选择:测定对象通常选择不接触被测毒物的正常人。(排除了影响测定指标的疾病和因素的人)制定生物样

3、品本底值的基本要求3.确定样本数量:样本数量的确定应根据测定的目的的要求和被测指标的波动范围及人力、物力而定,一般不少于100例。4.确定本底值范围:按统计学方法对测定结果进行正态性检验,根据测定结果的分布类型,选用相应的统计方法。偏态分布用百分位法计算本底值范围;测定数据成正态分布,用正态分布计算本底值范围。二、生物样品采集和保存采样方法采样时间和间隔测定目的储藏存放采集何种样品采样时间的选择具有生物限值的化合物,其生物材料采集具有明确规定,应严格执行。没有限值的生物样品,采集时间应根据毒物代谢动力学为依据:半减期短的(几分钟~几小时)化合物,其在各种组织中的水平变

4、化很快,所以采样时间限制要严格;半减期较长的毒物或代谢物,它们在各种组织中的浓度反映了较长时间的接触程度,所以采样时间可以不太严格。采样时间的选择在生物限值或检测方法中规定的采样时间:班前是指工作班前1小时。班中是指开始正常工作后2小时到下班前1小时。班末是指下班前1小时。班后是下班后1小时。下一班班前是指第二个工作班前1小时。工作周末的班末是指一个工作周(通常为5个工作班)的最后一个工作班下班前1小时。采样环境检测对象应离开工作场所,脱去工作服,洗净手、脸及取样部位,有条件的要在洗浴后进行。采样地点应清洁,没有污染;选择避风和上风方向的场所进行,同时注意由于通风造成

5、的污染。检测原形化合物时,对环境的污染要特别注意。容器的选择和清洗一般根据待测物的化学性质、样品的性状和样品需要保存的条件来选择容器。待测物是无机金属和类金属化合物,可用高压聚乙烯塑料、聚丙烯塑料、石英、硬质玻璃等容器。待测物为有机化合物,采样用的容器应选用玻璃或聚乙烯等制品。容器的选择和清洗注意事项:要避免使用橡胶和添加染料的制品。如果样品需要冷冻保存,则不宜用玻璃容器,以防冻裂。采样用的容器应进行本底值抽检,空白值要低于方法的检出限。在采样容器上必须贴上统一的标签,标签上注明采样日期、样品编号(与采样记录用统一的编号)、加入了什么防腐剂及加入量等项目。头发的采集和

6、保存采集头发的优点采样时受检者无疼痛、无创伤样品容易储藏和运送样品可长期保存,必要时可复检能够反映某个时期微量元素的吸收和代谢的历史。三、生物样品的检测方法介绍本部分仅介绍目前常用的生物样品中化学物质的检测方法常用检测技术分类方法光谱法分子光谱原子光谱色谱法气相色谱液相色谱离子色谱质谱法气质液质ICP-MS电化学法极谱法电位溶出电位分析法电导法容量法酸碱滴定、氧化还原滴定、络合滴定、.…..分子光谱(分光光度法)紫外分光光度法红外分光光度法可见分光光度法荧光分光光度法用于无机和有机化合物的测定原子光谱法原子吸收光谱法(AAS)原子荧光光谱法(AFS)原子发射光谱法(A

7、ES)主要用于金属和类金属的测定色谱法用于分离和测定多种有机化合物和阴离子等化合物色谱类别分析对象气相色谱(GC)分子量小于400有机物高效液相色谱(HPLC)分子量400~1000有机物离子色谱(IC)F-、Cl-、SO42-等电化学法用于测定氟及一些金属化合物,灵敏度高,精密度取决于仪器性能和操作。催化极谱法电位溶出法离子选择电极法样品检测定量方法校准曲线法标准加入法内标法定量方法:校准曲线法标准曲线法:用标准溶液直接配制标准系列进行测定,样品基体不干扰测定时使用。工作曲线法:样品基体对测定有干扰时,在标准系列中加入样品基体直接进行测定,或同样品

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