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《致龋性菌斑提取技术探究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、致精性菌斑提取技术探究进展［摘要］致頻性菌斑是頻病发生的始动因子，其形成并生长于口腔这一特殊的生理环境中。因此，对其精密而准确的提取技术是科学研究成功的关键。本文就致頻性菌斑的多种提取技术作一综述。［关键词］致鹉性菌斑；提取技术；进展［中图分类号］R781［文献标志码］A［doi］10.3969/j.issn.1673-5749.2012.01.014ResearchprogressonthetechniquesofextractingcariogenicplaqueLiJingwen,WangSheng,HuTao
2、.(Dept,ofConservativeDentistryandEndodontics,WestChinaHospitalofStomatology,SichuanUniversity,Chengdu610041,China)［AbstractJCariogenicplaqueisthekeyfactortotheoccuranceofcaries,whichformsanddevelopsinoralcavity,aspecialphysiologicalenviroment.Therefore,thepreci
3、ousandaccuratetechniqueofextractionisvitalforsuccessfulresearch・Thisarticlesumsuptheadvantagesanddisadvantagesofvarioustechniquesofextractingcariogenicplaque.[Keywordsjcariogenicplaque;techniquesofextraction;progress牙菌斑是一种典型的口腔生物膜，是龈病和牙周病的致病因子。科学合理的提取技术能保证牙菌斑完整
4、的生物学形态,能够提高研究的真实性、可靠性。菌斑提取技术可分为体内与体外培养提取2大类，本文将对其作一综述。1体内提取技术1.1染色刮取
5、=
6、采集牙菌斑前，令受检者2h以上不进食并除去口内食物残渣，然后在无菌纱托或纱球吸湿及局部隔湿条件下，用生理盐水冲洗采样部位，进行菌斑染色后用无菌探针刮取牙齿唇颊面的菌斑样本，置于还原液内口］。这种方法主要应用于即时评估牙菌斑的形成情况，例如：对人牙菌斑和唾液中淀粉酶和蔗糖酶的活性测定［2］、评定各类漱口水的作用效果、评估口腔卫生状况、药物等对菌斑中菌群的影响及菌斑中幽门螺杆菌的测
7、定等。这种提取技术简单、快速、易行，但易破坏菌斑的自然结构，而且不利于菌斑的动态观察，不能研究其演化发展过程。1・2黏附体取样在清洁处理后的牙面上放置内径2mm的尼龙线圈，5d后取下此装置，收集结构完整的牙菌斑，应用荧光素处理,m2再用荧光显微镜对其进行观察，镜下可见：由荧光素充满的空隙将密集的细菌群体分开，生物膜底层有许多不规则的、大小相近的圆形小凹，这是釉质表面的特征性结构。应用共聚焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscopy,CLSM)观察分析此方法获得的菌斑可发现：牙菌斑是
8、成层样堆积的，细菌的聚集从融质表面向上扩展形成蘑菇状，由液体充满的通道隔开，布满整个生物膜全层，通道在生物膜内类似一个初级循环系统，对维持细菌自身稳定有着重要的意义［3］。此方法可以获取完整的自然菌斑，有利于保持牙菌斑的生物结构，并且能够灵活掌握实验时间，可以初步了解菌斑的形成过程和结构的动态演变。但其也存在一定的局限性，由于线圈细小，不易置入和取出，同时其在口腔中的稳定性较差。1・3夹板取样将直径为5mm,厚度为1.5mm的模拟釉质(轻磷灰石片)和玻璃芯片插入丙烯酸夹板中，固定于受试者口腔内，分别在1、2、3d后取
9、出平板，在平板表面即可获取自然生长的菌斑。可用此方法评估自然生长牙菌斑的生命力及形态，如探索牙菌斑生物膜中活菌和死菌空间分布［4］,研究牙齿修复材料对生物膜的影响⑸等。1.4支架取样利用人类未萌出的第三磨牙制成长2mm、宽2mm、厚1mm的融质薄片，将其放入超声池中清洁20min后，用乙烯氧化物消毒，然后利用红色牙蜡将其固定于特制的丙烯酸支架上。制备2个双边下颌支架（横跨第一前磨牙到第一磨牙的颊侧面），每个支架上放置3个薄片。在插入支架前，去除受试者牙表面的可见菌斑并抛光牙表面。最后，将支架置入受试者口中，分别于4h
10、和8h后取下观察［6］。此方法成功建立了体内菌斑生物膜的生长模型。由于本实验是应用未萌出的第三磨牙制取釉质磨片，与夹板取样中制作釉质磨片的材料相比更为优越，因为其采用的是无牙菌斑附着的天然驸质，更能反映出细菌在铀质上初步定植的情况。继而又有研究者对这一方法进行了改进。研究者改造了口内的丙烯酸支架，在抛光直径为3mm.厚度为2mm的玻璃薄片后，将
