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时间:2019-11-29
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1、实验四果蔬中维生素C的提取工艺条件探究一、实验目的I•学习果蔬小维生索c的提取工艺的原理和方法2.学习维生素C的紫外分光光度法分析3.学习以正交实验法优化工艺条件的试验方法4.学习超声波法在提取中的应川。二、实验原理维生素C(简称Vc)乂叫抗坏血酸,是一种水溶性维生熟化学式为C6H8O6,维生索C纯品为口色无臭结晶,熔点在190—192°C,易溶于水,微溶于丙酮,在乙醇中溶解度更低,不溶于汕剂。结晶抗坏血酸在空气屮稳定,但它在水溶液屮易被空气和具他氧化剂氧化,生成脱氢抗坏血酸;在碱性条件卜•易分解,见光加速分解;在弱酸条件
2、中较稳定。维生素C不仅具冇广泛的生理功能,能防止坏血病、关节肿,促进外伤愈合,使机体增强抵抗能力。而且在食品工业上常用作抗氧化剂、酸味剂及强化剂。超声提取是超声波对液体中固体物质作用时,产牛空化效应,造成主物细胞壁及整个先物体的破裂,加速溶剂进入细胞。同时,超声波的振动作用强化了胞内物质的释放、扩散和溶解,使化学成分快速进入溶剂中,从而达到捉取的目的。三、仪器和试剂1.仪器烧杯(lOOmLs500mL>50mL)、量筒(10mL)>锥形瓶(150mL)、0.45pm微孔滤膜、50mL比色管UV1102型紫外可见分光光度计、
3、超声波清洗器、电子天平、榨汁机、真空抽滤机、高速离心机、2.试剂Vc抗坏血酸(A.R)、HC1(A.R)、1.0mol/LNaOH(A.R)>磷酸(A.R)、2.0%(W/V)偏磷酸(A.R)、蒸憎水、冰、西红柿四、实验步骤1、样品的处理将西红柿洗净、擦干,称取具有代表性样品的可食部分,放入榨汁机屮榨汁,将西红柿汁盛装在烧杯屮,放登阴凉处备用。1.1料液比不同的维生素C含量提取分别量取3mL西红柿汁于编号1、2、3、4、5的5个50mL小烧杯屮,在超声功率280W、超声时间30min>2.0%偏磷酸、冰水混合条件下,分别加
4、入按1:1、1:2、1:3、1:4、1:5的料液比对原材料进行超声提取,过滤,高速离心分离lOmin,取上清液即为待测果蔬提取液。1.2超声时间不同的维生素C含量提取分别量取3mL西红柿汁于编号2.1、2.2、2.3、2.4、2.5的5个5OmL比色管中,在超声功率280W.2.0%偏磷酸、料液比1:1、冰水混合条件卜,分别在5、10、20、30、60min不同时间下对原材料进行超声提取,过滤,高速离心分离lOmin,取上清液即为待测果蔬提取液。以上操作均耍求避光、迅速,处理后的样品于阴凉处保存,防止维生素分解。2、果蔬样
5、品吸光度的测定2.1果蔬料液比不同的提取液样品吸光度的测定2.1.1待测果蔬提取液分别取步骤1.1料液比对维生素C含最提取液l.OmL的待测果蔬提取液,放入5编号1、2、3、4、5的5个50mL比色管中,用浸提剂2.0%偏磷酸稀释至刻度,摇匀。以蒸傭水为空白,在最大吸收波长240nm测定其吸光度,并记录数据。2.1.2碱处理果蔬提取液分别取步骤1.1料液比对维生素C含呆提取液l.OmL的待测果蔬提取液,放入5编号1、2、3、4、5的5个50mL比色管中,分别加入4mLImol/LNaOH溶液,摇匀,静置20min后,加入浸
6、提剂2.0%偏磷酸,混匀,并定容至刻度。以蒸係水为空白,在最大吸收波长240nm处测定其吸光度,并记录数据。2.2果蔬超声时间不同的提取液样品吸光度的测定分別取步骤1.2超声时间对维生索C含屋提取液l.OmL的待测果蔬提取液,放入5编号1、2、3、4、5的5个50mL比色管小,重复步骤2.1.1、2.2.2的操作,分别测定其吸光度,并记录数据。2.3吸光度确定待测果蔬提取液与碱处理果蔬捉取液的吸光度Z差即为果蔬样品吸光度。五、数据记录及处理1、标准曲线的绘制维生素C标准溶液c=100ug/mL波长X=240nmV维生菇c标
7、准溶液/mL0.51.01.52..02.53.03.54.04.55.0C/ng/mL12345678910吸光度A0.1260.2140.3010.3990.4710.5590.6500.7470.8210.900标准曲线如图:186420••••oooC§宰祭V?=0.9A99-5c/
8、4e/mL10152、维生素C含量的计算测得果蔬样品的吸光度后,依据标准Illi线方程,即可计算出果蔬屮维卞索C的含量[mg/100g]毎牛奎「令三_c'F总•待丸总•K)O丑工羽V臣虽Xxw总xlooo—式中:C为依标准曲线方程计算
9、得到的维生素C浓度讨电・mL丄;刃为测吸光度时吸取样品溶液的体积.mL;V总为吸取样品定容总体积・mL;V待测总为待测样品总体积•rnL;W总为果蔬质量.g;100为100g果蔬“3、单因素试验3.1料液比对维生素C含量的彩在超声功率280W、超声吋间30min、2.0%偏磷酸、冰水混合条件下,分别加入
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