考点加强课6限制酶的选择与目的基因的检测与鉴定随堂真题演练

《考点加强课6限制酶的选择与目的基因的检测与鉴定随堂真题演练》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、随堂•真题演练1.(2012诠国新课标，40)根据基因工程的有关知识，回答下列问题。(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有和(2)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下：AATTCGGCTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是o(3)按其来源不同，基因工程屮所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是,产物是o若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。(5)基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。(6)若用重组质

2、粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是O2.(2015-江苏卷，32)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋口A、B分别表示卩■半乳糖昔酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答卜列问题：启动子图1复制原点b-半乳糖n：酶编码区A或B链编码区抗性基因纯融合伍白A9胰管培A入1大肠杆慚澳化纯寸朋矿—I融合盈白B—胰陥索B链(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是。(2)图1中启动子是酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的

3、基因的表达；氨节青霉素抗性基因的作用是o(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有o(4)卜半乳糖昔酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于O(5)澳化氧能切断肽链屮甲硫氨酸竣基端的肽键，用澳化氧处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且卩■半乳糖昔酶被切成多个肽段，这是因为(6)根据图2中胰岛素的结构，请推测毎个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是,理由是o1.(2014-天津理综，节选)嗜热土壤芽抱杆菌产生的0■葡萄糖苛酶(BglB)是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：I.

4、利用大肠杆菌表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时，选用基因组DNA作模板。(2)如图为质粒限制酶酶切图谱。bg/B基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bgIB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入和不同限制酶的识别序列。注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为随堂•真题演练1答案⑴黏性末端平末端(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同(其他合理答案也行)(3)大肠杆菌(Ecoli)T4(4)mRNA(或RNA)

5、cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌体动植物病毒(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱2答案(1)终止子(2)RNA聚合作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选岀来⑶限制酶和DNA连接酶(1)防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解(2)卩一半乳糖昔酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸(3)至少2个两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基3答案(1)嗜热土壤芽孑包杆菌(2)NdeIBamWI(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶