《动物解剖及生理学》实验指导

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1、成都农业科技职业学院《动物解剖及生理学》实验指导（畜牧兽医专业适用）二零零七年八月基本技能训练一显微镜的使用及基本组织观察学时安排：2学时一、目的要求通过本次实验，使学生常握光电显微镜的基本结构及使用方法。认识上皮组织的种类及构造,并能够辩认各种上皮；认识结缔组织的慕本形状和构造；并熟记各种结缔组织间的区别；掌握肌肉组织的特点，并能区分三种不同的肌肉。二、材料及用具光电显微镜、切片。三、技能内容与方法步骤1・显微镜的一般构造：分光学部分和机械部分：⑴光学部分口镜：装在镜筒上端，里面装有指针，常用的为10x口镜。物镜：装在转换器上，一般常用的物镜为4x、10x、40x和100x

2、（油浸镜头）。集光器：包括聚光镜和光圈（虹彩）两部分。装于载物台下面。⑵机械部分镜座：为显微镜基部，用以固定镜身。载物台：为放置标本的平台，其中有通光孔，两旁有压片和标本移动器。镜头转换器：位于镜筒之下，可装物镜，为转换不同倍数的物镜用。粗调节轮：旋转时，载物台升降距离较人。微调节轮：旋转一周，可使镜头升或降0」毫米。镜臂：供握持显微镜用。粗调限位器：拨下限位器使载物台只能使粗调上升至所限位置，町避免因操作不慎而导致高倍镜与标本相碰。2.显微镜的使用方法⑴低倍镜使用法：%1将4x物镜移至小央（位于光轴上），旋动粗调节轮使物镜与载片相距1厘米左右。%1打开光圈，上升集光器至镜平

3、台，用左眼或右眼在li镜中观察（两眼都要睁开），同时用反光镜（自带光源的显微镜除外）取光至视野均匀明亮。%1将切片标本置于载物台上，使切片内的标本，对准镜台屮央小孔，然后用压片夹固定切片。%1以左眼或右眼对准口镜，进行观察。旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，至标木的影彖现出为止，拨动粗调限位器限位。%1旋动细调节轮，使载物台上、下微微移动，直到显出清晰的影象。⑵高倍镜使用方法.%1依前拄先用低倍镜将焦点调准，使物象清晰。%1将欲检标本的某一部分移至低倍镜视野中央。%1下降载物台，转动转换器，将高倍物镣移至屮央（位于光轴上），旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，至标本的影象现出为止。

4、%1旋动细调节轮，使载物台上、下微微移动，直到显出清晰的影象。⑶油镜的使用方法：%1用油镜前，先将集光器上升到顶，虹彩放大，使亮度达到最强度。%1将需要详细观察的部分，移到视野中心，用压片夹固定，切勿移动。%1将高倍物镜移开，滴加一滴香柏汕于切片被检部位%1下降载物台，转换油镜头，旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，使镜头与被检物间充满香柏汕，然后转动细调节轮，直至有清晰的物象为止，此时切勿使用粗调节轮，以免压碎切片，损坏镜头。%1用完油镜后，必须将镜头和切片上的香柏油用擦镜纸擦去，并用沾有乙醋——酒精液（7：3）的擦镜纸擦拭镜头及载片，以免污损镜头。2.使用显微镜注意事项%1移

5、动显微镜时一手紧握镜臂，一手平托镜座，使镜身保持直立状态。%1凡光学部分不可用于指或其它物晶（如毛山、纸张）擦拭，要用清洁的擦镜纸，必要时加一滴乙瞇——酒精液擦拭。%1不得随意拆卸显微镜的任何组成部分。%1不能用高倍镜检视任何不加盖片的标本，以免污染物镜，显微镜任何部分不应受潮。%1掉换高倍物镜或汕浸镜时，一定要下降载物台，转换镜头，旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，不能直接将镜头进行转换，以免损坏载片及镜头。%1在切片和镜头很接近的情况下，要在看口镜的同时用余光注意两者Z间的距离，以免损坏载片及镜头。%1左手写字右眼看H镜，右手写字左眼看冃镜，两眼同时曲开。%1使用中发生问题

6、时，请随时报告教师，切勿自行处理。3.基本组织观察㈠上皮组织1、单层上皮⑴单层扁平上皮肠系膜装片，硝酸银镀染。肠系膜片薄不同，在观察时应选择标本最薄的部分，细胞间界限由于硝酸银镀染而呈黑色、被镀染的黑色锯齿状线不是细胞膜。而是细胞之间的细胞间质。此种黑线，可以将肠系膜的间皮细胞和微血管的内皮细胞界限区分清楚，细胞质部分稍呈淡黄色，核呈空泡样（如用染料复染,则可显示出）。⑵单层柱状上皮猪I-二指肠横切片，或胆囊切片。Bouin氏液固定，石蜡包埋，苏木素——伊红染色（HE染色）低倍镜下十二指肠横切片，可见到小肠的腔面有许多髙矮不一•的指状突起，这些突起是小肠绒毛的纵断面。其表面覆

7、盖着一层柱状上皮，选择一部分排列整齐，换高倍镜观察。在高倍镜下，柱状细胞排列紧密，细胞的高度大于宽度，细胞界限不太清晰。胞核呈椭閲形，位于细胞的基部。细胞的游离面（朝向肠腔的一而）上，在光学显微镜下可见到一薄层红染的结构称纹状缘（电镜下为胞质的微小突起称微绒毛），细胞的基底面与基膜相接（基膜用特殊染色才可显示出来），基膜的下方为结缔组织。在柱状上皮细胞之间，有散在的杯状细胞。杯状细胞外形呈高脚酒杯状，顶部充满粘原颗粒，基部有细胞核。另外在柱状细胞间，有时可见到深染的淋巴细胞°⑶假复层柱状纤毛上皮猪气管横