生理学实验指导

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1、生理学实验指导（生物工程2012级3、4班用）实验一、神经干复合动作电位的引导【目的要求】1.  学习电生理实验方法。2.  观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生的基本原理。【基本原理】神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如果在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。神经细胞的动作电位是以“全或无"方式产生的。坐骨神经干是以由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺

2、激强度下是随刺激强度的变化而变化的。【动物与器材】蟾蜍或蛙、常用手术器械、计算机采集系统、神经屏蔽盒、任氏液。【方法与步骤】1. 制备蛙或蟾蜍坐骨神经干标本。2. 将蛙的坐骨神经干标本置于屏蔽盒内的电极上，神经干的中枢端置于刺激电极一侧，从末梢端引导动作电位3.  实验观察与记录(1)  神经干兴奋阈值的测定刺激强度从0.1V开始，逐渐增加刺激强度，当刚刚出现动作电位时的刺激强度，即为神经干的兴奋阈值。(2)  双相动作电位在刺激阈值的基础上逐渐加大刺激强度，可见动作电位的图形为双相，而且其幅值随刺激强度增大而加大。当刺激增加到一定强度时，可见动作

3、电位的幅值不再增大。(3)  动作电位参数的测量用鼠标点击“快捷工具栏”的“观察”，移动鼠标，测出动作电位的一系列参数。(4)  单相动作电位在两个引导点击之间损伤神经干标本，可使原来的双相动作电位的下相小时，变为单相；注意上相动作电位的图形有什么变化。【注意事项】a)      实验过程中注意保持标本的活性良好，经常用任氏液湿润之。b)     如果在显示窗上发现动作电位图形倒置，将引导电极位置交换即可实验二、反射时的测定与反射弧的分析【目的要求】1．学习测定反射时的方法。2．了解反射弧的组成。【基本原理】从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射

4、时。反射时是反射通过反射弧所用的时间，完整的反射弧则是反射的结构基础。反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物(如脊蛙或脊蟾蜍)为实验材料，以利于观察和分析。【动物与器材】蟾蜍或蛙、常用手术器械、支架、蛙嘴夹、蛙板、蛙腿夹、小烧杯、小玻璃皿(2个)、小滤纸片、棉花、秒表、纱布、0.5％及1％硫酸溶液、2％普鲁卡因。【方法与步骤】1．取一只蟾蜍(或蛙)，制备脊蟾蜍(或脊蛙)，腹位固定于蛙板上。剪开右侧股部皮肤，分离出坐骨神经穿线备用。2．取下蛙腿夹，用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌，悬挂于支架上。将蟾蜍右后肢的

5、最长趾浸入0.5％硫酸溶液中2-3mm(浸入时间最长不超过l0s)，立即记下时间(以秒计算)。当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。重复测定屈反射时3次，求出均值作为右后肢最长趾的反射时。3．用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后再用手术镊剥净长趾上的皮肤。用硫酸刺激去皮的长趾，记录结果。4．改换右后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸溶液中，测定反射时，记录结果。5．取一浸有1％硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧背部或腹部记录擦或抓反射的反射时。6．用一细棉条包住分离出的坐骨神经，在细棉条上滴几滴2％普鲁卡因溶液后

6、，每隔2min重复步骤4(记录加药后反应时间)。【注意事项】1．每次实验时，要使皮肤接触硫酸的面积不变，以保持相同的刺激强度。2．刺激后要立即洗去硫酸，以免损伤皮肤。【作业】1、写出不同实验结果的反射时间。实验项目反应时间（S）平均第一次第二次第三次有皮肤脚趾无皮肤脚趾普鲁卡因麻醉2、说明反射弧的几个组成部分。实验三、蛙类心脏的期前收缩与代偿间歇【实验目的】1、观察心脏在兴奋过程中兴奋性变化2、学习在体蟾蜍（或蛙）心搏动曲线的记录方法3、观察期前收缩和代偿间歇，并理解其生理意义【实验原理】心肌在经历一次兴奋后，其兴奋性会发生一系列周期性的变化。心脏

7、的兴奋性分为以下几个时期：绝对不应期、有效不应期、相对不应期和超常期。心肌兴奋后的兴奋性变化特点是其有效不应期很长（约百毫秒），约相当于心动周期的整个收缩期甚至加上舒张早期。在此期中，任何强大的刺激均不能使之产生动作电位，不能发生兴奋和收缩。此后为相对不应期，可对强刺激产生动作电位。最后为超常期，此期兴奋性高于正常，稍低于阈强度的阈下刺激就可以引发出动作电位。后两期均发生在心肌的舒张期内。因此，如果在心脏的有效不应期之后，给予心室一次人为的或起自窦房结以外的阈上刺激，便可以在正常节律性兴奋到达心室之前，引起一次扩布性的兴奋和收缩，由于该兴奋和收缩发

8、生也在正常节律性兴奋之前，故称为“期前收缩”（亦称“早搏”）。期前兴奋也是一次心脏兴奋，因而有自己的有效不应期，当紧接在期