遗传育种课程论文

《遗传育种课程论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、食用菌的遗传转化研究与应用摘要近年来遗传转化技术的发展给食用菌新菌株的培育开辟了一条新的途径，有望解决传统食用菌新菌株育种周期长、定向性较差的特点。木文综述了食用菌分子水平遗传转化的方法、筛选标记和遗传转化应用的进展。关键词：食用菌遗传转化筛选标记EDIBLEFUNGUSGENETICTRANSFORMATIONOFRESERCHANDAPPLICATIONSHENchuan-bin,DINGyan-qin(Departmentofmicrobiology,Collegeoflifescience,ShandongAgriculturalUniversity,Taian2

2、71018,China)Abstract:Recentyearsthedevelopmentofgenctictransformationtechnologyforcultivatingnewstrainsofediblefungiopensupanewway,anditisexpectedthatgenetictransformationtechnologywi11shortenthebreedingcycleandmakethetraditionalbreedinghaveaclearerdirection・Thispaperreviewedthemushroomge

3、netictransformationmethodinmolecularlevel,theselectionmarkersandgenetictransformationapplicationprogress.随着生活水平的提高，人们对食用菌数量和品质的要求愈来愈高。由于食用菌的遗传背景复杂、育种周期长、定向性较差，传统的食用菌新菌株培育方法（自然选择、杂交育种）已不能满足人们对新菌株的需求。遗传转化技术的发展给食用菌新菌株的培育开辟了一条新的途径。转化是一种使种内、种间以致更远缘的基因得以转移的的技术。遗传转化在食用菌种的应用主要集中在以下两个方面：一是利用食用菌作为新

4、的基因工程的受体菌，生产人们所期望的外源基因编码的产物（即作为生物反应器）0这是因为食用菌安全可食且具有很强的外源蛋白分泌能力，利用食用菌作为新的受体菌表达外源蛋白将更安全、产物更易于纯化；二是利用基因工程技术定向培育食用菌新品种，包括抗虫、抗病、优质（富含蛋白质、必需氨基酸或延长货架寿命等）的新品种，以及将编码纤维素或木质素降解酶的基因导入食用菌体内，以提高食用菌菌丝对栽培基质的利用率或开发新的栽培基质，最终提高食用菌的产量和质量。1食用菌遗传转化方法真菌的基因转移历史相当的短（Fincham,1989）OMishra和Tatum（1973）首次报道了真菌中的基因转化。

5、但是食用菌的基因转化研究起步更晚，90年代初以来，大型真菌的基因转化研究才逐渐开展起來。1.1PEG法PEG能使细胞膜之间或DNA与膜之间形成分了桥，促使细胞接触和粘连或是通过引起表面电荷紊乱，干扰细胞间的识别而有利于细胞间的融合或外源DNA的进入。2006年Li等［5］采用了PEG介导的高效平菇转化系统，得到780^180个整合了潮霉索B稳定抗性的克隆，比以前的报道高40~1800倍。1.2电激法电激法是利用高压电脉冲作用，在原生质体膜上“电激穿孔”(Electroporation),形成可逆的瞬间通道，促进外源DNA的摄取。1991年,RoyerJC等首先采用电激法把

6、编码二氢乳清酸脱氢酶基因URA1导入同源的杨树菇营养缺陷型突变菌株中，获得正常表达的杨树菇，接着双砲蘑菇、糙皮侧耳等也用该法进行遗传转化，获得转化了。1.3基因枪法该法是利用高速微弹把外源基因导入受体生物的完整细胞或组织中。郭丽琼等(2005)潮霉素抗性基因(hpt)为筛选标记基因，gus为报告基因，采用基因枪法把外源gus基因转化进草菇的菌丝体中，且能在菌丝体中稳定表达，建立了草菇基因枪法遗传转化体系。MasahideSunagawa等于2002年首次报道用基因枪法进行平菇尿喀噪营养缺陷型原生质转化，在2种不同的靶距和氨压条件下获得5个转化子，转化率为1个转化子/ugD

7、NA。质粒DNAs被整合到基因组DNA并能稳定遗传。1.4限制酶介导法(RestrictionEnzymeMediatedDNATntegrati,REMT)jiff该法的主要原理是，限制性内切酶穿透细胞膜和核膜，在特杲的酶切位点活体切断染色体DNA,产生的染色体DNA末端会在宿主细胞酶系的作用下与限制性内切酶切断的线性化的质粒DNA相连接。Jose等在灰盖鬼伞(Co-prinuscinereus)转化屮利用了“限制酶介导DNA整合”技术，将限制性酶加入转化混合液中，在限制酶作用下，线型DNA插入受体的染色体中，并提高了转化效