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时间:2019-11-28
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1、UV-2550紫外分光光度计的使用和分光光度法测定对苯二酚9141160D0420何琰1.目的(1)了解UV-2550紫外光谱仪的基本使用方法。(2)了解测定对苯二酚的紫外光谱实验方法。2.试剂和仪器2.1试剂:标准溶液0.10mg/mL,准确称取0.25g对苯二酚溶于250ml容量瓶中,用水稀释至刻度,从中取出10ml于100ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀;pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液。2.2仪器:UV-2550型分光光度计。3.实验步骤3.1测量波长的选择用吸量管吸取5.0ml对苯二酚标准溶液于25ml容量瓶中,加入0.
2、5mlpH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液,用二次蒸馏水定容,振荡混匀。15分钟后用1cm比色皿,275-330nm波长范围,进行扫描。从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax。3.2对苯二酚含量的测定(1)标准曲线的制作在6个25ml容量瓶中,用吸量管分别加入0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml对苯二酚标准溶液,加入0.5mlpH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液,用二次蒸馏水定容,振荡混匀。用1cm比色皿,以试剂空白为参比溶液,在最大吸收波长处,用光度模块作标准曲线。(2)试样中对苯二酚含量的测定准确吸取一定体积的样品于
3、40ml容量瓶中,加入0.5mlpH=4.1乙酸-乙酸钠,用水稀释至刻度,摇匀。在光度模块中直接读出试样中对苯二酚含量。4.实验结果4.1测量波长的选择从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax=288.80。见图1吸收曲线4.2对苯二酚含量的测定(1)标准曲线的制作见图2标准曲线(2)试样中对苯二酚含量的测定对苯二酚含量0.354相对误差为11.5%图1吸收曲线图2标准曲线
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