滇南黄草乌内生真菌的分离和初步鉴定

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1、滇南黄草乌内生真菌的分离和初步鉴定【摘要】从滇南黄草乌•植物的根和茎中分离获得37株内生真菌，经显微形态观察进行初步鉴定，归属为3目､5科､12属，其屮镰抱霉属为优势属;且滇南黄草乌不同部位内牛真菌的数量&S65380;分布和种样存有差异｡【关键词】滇南黄草乌内生真菌分离鉴定【中图分类号】R282・5;R284・2【文献标识码】A【文章编号11007-8517（2008）07-0010-03黄草乌为毛萇科乌头属植物的干燥块根，俗称人草乌｡野生滇南黄

2、草乌是植物卡氏乌头的侧生块根，别名藤乌､黄草乌､小草乌，属藤本耐寒植物[1]｡黄草乌，云南素有大补药Z称，是云南白药等名贵中成药的主耍原料2—，有搜风､除湿､活血､止痛等功效｡对滇南黄草乌植物的研究报道主要针对植资源开发及种植技术､人工驯化和提取植物中化学成分等，而对该植物内牛真菌的发现､种类组成､数量与分布和种群多样性及英代谢活性物质的研究报道至今未见ᦉ

3、7;我们对滇南黄草乌植物内生真菌作了系统的研究，从菌株分离､分类鉴定到代谢活性产物的分离等，木文首次就滇南黄草乌植物内牛真菌分离和分类鉴定的资源学方血进行研究报道｡対其代谢活性产物的筛选和分离研究将1材料1.1植物样品活体植物滇南黄草乌采自云南省会泽县大海乡中草药种植基地，海拔高度3150m｡1.2培养基分离培养基:PDA培养基（马铃薯葡萄糖培养棊），临用吋每毫升培养棊中加80单位的青霉素以抑制细菌生长；鉴定培养基：PDA培养基和促抱培养基（KH2P04,MgS

4、04•71120,KN03,KC1,葡萄糖，蔗糖）｡2方法2.1内牛.真菌的分离2.1.1样品消毒处理首先用自来水冲洗净滇南黄草乌植物的根､茎表而的泥沙，进行表而消毒[2}｡2.1.2分离培养将消售好的滇南黄草乌植物在无菌状态下切成0.3X0.3cm大小的片段种植在PDA培养基里，置于28°C±1°C的温箱屮静止培养｡培养3~15d示，可见有菌丝生长，挑取植物组织周围的菌丝转接入PDA试管斜面，经纯化即得滇南黄草乌植物内生真菌ʍ

5、77;2.2内生真菌的鉴定采川插片培养方法，对分离获得的滇南黄草乌植物内牛真菌进行显微形态特征的观察､鉴定｡鉴定检索参照文献[3,4]｡3结果与讨论1.1滇南黄草乌植物内生真菌的种群组成从滇南黄草乌植物屮分离获得内住真菌共37株｡经显微形态观察，归属为3戸､5科､12属（见表1）｡从衣1可看出,37株滇南黄草乌植物内生真菌主要分布在丛梗砲目和无砲目，分别有25株和9株（占菌株数的67.57%､

6、24.32%）;暗梗抱科和无抱菌群为滇南黄草乌植物内牛真菌的优势菌群，分别占菌株数的35.14%和24.32%;镰泡霉属有7株（占•菌株数的1&92%）为滇南黄草乌植物内生真菌优势属种，其次是毛壳菌属､交链砲霉属和匐柄雹属都是3株（占菌株的8.11%）,而青霉属､葡萄抱属､木霉属和枝抱属则分别只有1株｡3.2滇南黄草乌植物内生真菌的分布在分离获得的内生真菌中，茎部分离获得的内生真菌在数虽和种属上都比根部的多（见表2）,从茎部分离获得的内生真菌冇22

7、株（占菌株数的59.46%）为8个属（占12个属的66.67%）,而从根部分离获得的内生真菌只有15株（占40.54%）5个属（占41.67%）｡从表2可以看出，从根和茎上分离获得的内生真菌在种群上完全不同，除了无抱菌群外没冇相似性;无砲菌群是根部的优势菌群，冇6株占根部菌株数的40.00%;根部的优势属种为毛壳菌属，有3株（占20.00%）;而茎部的优势属种是镰他霉属，有7株占茎部菌株数的31.82%,其次是匐柄霉属和交链砲霉属都是3株占13.64%｡在滇南黄草乌植物分离获

8、得的内生真菌在数量上相对较少，这可能与滇南黃草乌卅i物含有剧毒生物碱有关065377;研究结果表明，镰抱霉属不仅是整个滇南黄草乌植物内生真菌的优势种样，而且也是滇南黄草乌植物茎部内牛真菌的优势种类｡而且在滇南黄草乌植物根部和茎部所分到的内生真菌种群各不相同，在数量和分布上也存有明显差界，造成这样的现彖可能与乌头碱的种类和含量冇关，同时也表明滇南黄草乌植物内生真菌的数量和种群的多样性特点｡致谢:云南会泽县大海乡中草