松材线虫分离技术改进的初步研究

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1、第3卷第版）JERIY松材线斌,刘桂林107,材线121年6月01L0FHUI131No虫分离技术改进的初步研3期0URNAVo・惠州学院学报（自然科学H0UU3Jn究戴霖VSTZNI21u.01昌，郑付芹,曹惠州560)最佳起始温度多，第60在4线虫的最（惠州学院摘生命科学系，广东要：对松材线虫快速分离的条件进行了研究，果显虫分离的最佳环境温度为2q组合时总为4为3°C,这一温度为h时的12条，2小人溢出量在处理时间在近与了佳最个这的词度键的关定材炮对线标于虫识分离液的结松5C,卜'松材线山的溢出量溢出量为66条，0h时间段内，6少虫温编快；码速离材松文线分章3松树萎鴛病是松树的一种毁灭性病

2、害,其病原为松材线虫BrpenhsypisSirBhe）uahicux1hu（tn&uro该病seo1eer于一十ttt纪初（95年）日本长崎首次报道,1710在至92年才鉴定出其病原为线虫，myMaia和Kyhr(aiiaaMmyoa等，17)92定名为Brpenhsii1,91Nkuah1cu1nos18年■1e和Mmy将其更正为BrPenhsyoh1o关于松材segcu1aiauah1CUX1■1ssePU线虫，最早是see:和Ehe于12tnriurr99年在美国得克萨斯的长叶松材中分离出的，并命名为Ahlcoexlhpenhisypiedo1,9獰Nel将具归入Brpenhsu17s

3、iek,uah1cu属。松材线虫可导致大量的木材损失，se在我国被列为重要的检疫对象。日前，该病在日木、国、美加拿大、国等国家都有分布，韩因危害严重，于防治从而受到世界各国的重难视。我国从18年在南京中山陵风景区拘黑松上首次发现松材线虫后，已发展到江苏、92现浙江、安徽、广东、山东、湖北、上海、香港和澳门等地，并在上述地区有加速蔓延和危害的趋势。我国台湾省于二十卅纪七十年代发现该病，十世纪八十年代在台湾北部迅速蔓延，二现正逐渐扩散。松材线虫在1和我国已经造成了巨人的损失。它不仅给林业生产带来巨大损失，且造成生态景观和生3本而态系统的破坏，入侵广东二十多年以来，已经造成松林生态系统的严重破坏。该

4、宵的发生和发展涉及寄主、媒介和病原以及有关的微生物等多种生物因素,而病原即松材线虫为苴主要因索。冃前对松材线虫的研究比较深入，从松材线虫的形态、分子生物学、生活史以及松材线虫的致病机理都进行了详细的研究。研究表明，松材线虫的3龄（III）4龄（1幼虫在形态结构和生物化学上发生了某些变界，于被传媒昆虫携带传播。但是针对松材L和］V）L易线虫的分离技术则研究相对较少，快速分离鉴定松材线虫是控制松材线虫病扩散蔓延的基础，并对可能携带松材线虫的植物及其产品进行准确的检验检疫。因此，材线虫的快速检测技术已成为控制该病害扩散的重要手段松之一。审r最常用的快速检测技术主要是形态学检测，而形态学检测中最为关键

5、的一步就是从病木或待检产品屮分离虫体。本研究的冃的是通过试验对现有的线虫分离技术进行改进，以期建立一套完整的松材线虫快速分离技术，为松材线虫的快速检疫和控制其传播提供有力的技术保障。该技术的研究成果将具有明显的经济、社会和生态效益，着广阔应用前景。有1材料与方法11供试材料・本实验所采用的松材线虫病木（马尾松）自广东省从化市流溪河森林公园林场（采广东省惠州市神龙松材线收稿E期：01-5-212100基金项冃：惠州学院大学生创新实验项冃；惠州市科技计划项冃（冃编号：0000009项21C1040）作考简介：霖昌（91一）男，徽六安人，戴19,安惠州学院生命科学系生物科学08级本科生。通讯作者:桂

6、林.刘E-migl@hueuc.al1uz・d.n：i?38?惠州学院学报（自然科学版）21年第3011卷虫病综合治理有限公司提供）。12供试仪器.恒温培养箱，解剖镜，剪刀，线虫分离器。13•试验方法131材料处理与仪器设定・•分别设置2—2—3—3—4%五个环境温度和五个起始水温进行松材线虫的分离,0C、5C、0C、5C和0每个温度设5次重复。将松材线虫病木木块削成薄片状，并用剪刀将薄木片剪成长约为2e宽约为1e的木屑，m,m分别称取5g木屑置于5块纱布（每块两层），上用纱布将木屑包住，同时放入E径为1m的玻璃漏斗中，并10e待怛温培养箱内的温度（分别为2—2—3—3—41稳定Z后,0C、5

7、C、0C、5C和0C）将漏斗固定在恒温培养箱中，并将漏斗出水V用夹有止水1夹的橡皮管套住。将事先处理好的週単分别为2—2%、0c、54—5份自来水（0C、53o3—0C的C、每份10m