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1、活化部分凝血活酶时间APTT测定作业指导书1-实验原理确定量的血浆样本（50
2、11）经过一定时间（3min）加湿后9加入部分凝血活酶时间反应试剂（50I）,加温3min,加入0.025MCaCI250rI,采用波长660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出活化部分凝血活酶时间。2.标本采集2.1早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。2.23.8%（w/v）枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。3.标本存放：1小时内（3000r/minX15mi
3、n）分离血浆，室温放置不超过2小时，2〜8°C保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70°C不超过6个月），只能冻融1次，在37°C迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。4.标本运输：低温条件下运输。5.标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作该项目检测。6.实验材料:6.1德国DadeBehringMarburg公司活化部分凝血活酶时间反应试剂，每瓶2ml（40人份水剂），未开封试剂2〜8°C贮存到说明书上有效期，开盖后2〜8°C保存14天。6.20.025mCaC
4、I2,2〜8°C贮存到说明书有效期。6.3DadeCitrol质控血浆•用蒸f留水1ml溶解后放置30分钟，才能使用或分装。复溶后，室温保存2小时，2〜8°C4小时。7.仪器设备：7.1仪器名称：SysmexCA-1500全自动血液凝固分析仪2.2仪器厂家：日本Sysmex公司7.3仪器型号：SysmexCA-15007.4仪器技术参数：7.4.1速度:最快检测速度180测试/小时，组合检测约140测试/小时7.4.2试剂位：36个，具冷藏功能。7.4.3样本位：50个，可自动连续添加。7.5仪器校准程序：7.5.1
5、校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。7.5.2校准操作：设置标准曲线分析（由仪器提供商指定工程师执行）8.操作步骤：8.1检查前准备：2.1.1清空废液瓶，清空反应杯抛弃槽。8.1.2添加足够反应杯（不能超出警告线）。8.1.3添加清洁液、试剂，清洗用蒸f留水。8.2开机：先开打印机再开主机，开机后仪器自检，约15分钟，屏幕上方“NotReady变为“Ready”，表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，可进行测定。8.3输入工作清单：从主菜单选WorkList-
6、»出现第一架样本工作清单输入画面，选
7、lDNOEntry输入第一个样本号T按相应实验项目名称键更卫，并同时输入此标本的其他测试项目，若选“凝血四项（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按profile可组合选项选择，选中项目相应位置标记为tlO选完项目后按可确认，要删除某项目时只需按该项目名称键（按键如
8、APTT
9、O变为〔APTT卜）即可，T用TJ键，同样输入其他标本编号项目。快速输入可用〔Repeat
10、键,输入重复标本数，复制同样项目的输入。8.4放置样本：按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本
11、架上，并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置（最多同时放5架共50个样本）8.5按〔Start
12、键开始测定：盖好遮光盖，确认仪器为"Ready"状态，按［Start
13、^,进样开始，T测定进行，仪器显示为"Analying"（被选择项目背景变为此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单按Rigester,继续确认测试任务，添加样本架继续测试，T测定完成，测定项目背景变为打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态。8.6每日维护：完成每日的测定后，关机前维护。8.6.1冲冼针
14、RinseProbe8.6.2清空废液瓶，和已使用过的反应杯。8.6.3将试剂架连用试剂放入冰箱。6.7关机：先关主机，再关打印机。7.检验结果的判断与分析：9.1仪器测定APTT的线性范围在5-600秒，测定完成后仪器显示PT秒数，若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息:火次次•火出现错误，不能得到分析数据•-不能计算参数+++•+数值超出线性范围.9.2仪器设定APTT参考范围在23-35秒，如果得不到一个正常数值，在数据的左侧将出现下列标记：次出现错误信息<数据低于可报告的低限>数据高于可报告的高限10・质量
15、控制：每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。门・临床意义：APTT常用于内源性凝血系统（VIII、IX、XI、刈因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测。11.1参考范围：23-35秒（患者结果超过正常对照10秒以上为异常）11.2APTT延长：见过
