枸杞延缓小鼠皮肤老化实验探究

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1、枸杞延缓小鼠皮肤老化实验探究;作者：张华于学文杨学东白秀珍毕业论文【摘要】；目的：探讨枸杞延缓皮肤老化作用及其作用机制。方法：昆明种小白鼠颈部注射D?半乳糖，复制亚急性衰老模型。用黄11票吟氧化酶法测定皮肤SOD活力，用硫代巴比妥酸（TBA）法测定皮肤MDA的量，用碱水解法测定皮肤HOP含量，用HE染色法观察皮肤组织形态学改变。结果:给药组小鼠皮肤SOD活性明显增加，MDA含量明显降低，胶原蛋白含量明显增加，皮肤组织形态学检查结果与衰老模型组比较显示真皮层成纤维细胞数量增加，胶原纤维排列紧密，排列较规则。结论：枸杞可以延缓皮肤老化，浓度低于20

2、%时其作用随剂量增加而增强，当浓度髙于20%时其延缓老化作用随剂量增大而减弱。毕业论文【关键词】；枸杞水煎剂；皮肤老化；D?半乳糖；SOD；MDA；HOP毕业论文皮肤老化是整个机体衰老在皮肤上的反应，随着年龄的增加，衰老的最直观的变化即为皮肤。皮肤衰老不仅有损于美容，且与许多皮肤病如脂溢性角化、日光性角化、基底细胞癌、鳞状细胞癌的发生也有着病因学的关系。因此，预防和延缓皮肤衰老已成为生命科学研究的热点之一。本研究观察了外用枸杞水煎剂对D?半乳糖所致亚急性衰老模型小鼠皮肤的作用，为中医药化妆品发展提供基础资料。毕业论文1;材料毕业论文1?1;药品

3、外用枸杞水煎剂的制备：取宁夏枸杞子100g,用四分法将其缩减至50g,6（TC干燥后粉碎，称取40g粉末加10倍量80%乙醇冷凝回流提取2次，每次lh（保持微沸），8层纱布过滤；将药渣加8倍量水继续冷凝回流提取3次，每次lh（保持微沸），收集滤液；合并3次滤液，于旋转蒸发仪上浓缩至50mlo分别取一定量稀释至所需浓度（1%、10%、20%、40%、80%）,加入一定量的氮酮（Azone）使氮酮浓度达到3%,备用。SOD、MDA、HOP试剂盒、考马斯亮蓝液均购于南京建成生物研究所;D?半乳糖购于amresco公司；宁夏枸杞购于辽西国药店；其它试剂

4、均为国产分析纯。毕业论文1?2；实验动物昆明小白鼠80只月龄，雌雄各半，体重26〜30g,购自辽宁医学院实验动物中心。毕业论文1?3；仪器UV7517GD型紫外可见分光光度计（上海欣益仪器仪表有限公司）；脱水机、包埋机、切片机、染色机（英国SHANDON公司）；旋转蒸发仪RE?52（上海安亭电子仪器厂）；FDV高速风选式超细粉碎机（台湾佑崎机械制造公司）；高速离心机（上海手术仪器厂）；电热恒温水浴箱（北京光明医疗仪器厂）；XH?B型旋涡混匀器（姜堰市康健医疗器具有限公司）；BS223S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。毕业论文2；方法

5、毕业论文2?1；实验动物分组昆明小白鼠随机分成8组，每组10只，自由食水lw后，背部剃毛2X2cm区域，以后每5天剃毛一次。按照表1给予处理因素，连续50d。毕业论文表1;实验动物分组（略）■2?2；取材末次给药后将受试区域的被毛彻底剃干净，乌拉坦（1.5g/kg）麻醉取皮肤。毕业论文2?3；生化指标的测定毕业论文2?3?1；皮肤SOD、MDA含量的测定；（TC的生理盐水中去除皮下脂肪，滤纸拭干，按1：9的比例制生理盐水相皮肤匀浆液，3000rpm离心15min,取上清备用，按试剂盒说明进行操作。毕业论文2?3?2；皮肤HOP含量的测定；乙瞇消

6、化皮下脂肪，滤纸拭干，按照试剂盒说明，碱水解法测皮肤HOP含量。毕业论文2?4；组织学观察取受试皮肤，10%福尔马林固定，常规石蜡切片，HE染色，普通显微镜下进行组织学观察。毕业论文2?5；数据处理数据以均数土标准差表示，组间比较用单因素方差分析。毕业论文3；结果3?1；皮肤SOD、MDA含量毕业论文表2；皮肤SOD、MDA含量（略）毕业论文注：与对照组比较，#P<；0.01；与衰老组和氮酮组比较,*P<；O.05,**P<；O.010毕业论文3?2；皮肤HOP含量及胶原蛋白含量毕业论文表3；皮肤HOP含量及胶原蛋白含量（略）毕业论

7、文注：与对照组比较，#P<；O.01；与衰老组和氮酮组比较,*P<；O.05,**p<；o.01毕业论文图1;对照组（X400）（略）毕业论文图2；衰老组（X400）（略）毕业论文图3；给药III组（X400）（略）毕业论文3?3；皮肤形态学观察衰老组（图2）与对照组（图1）比较，胶原纤维染色减弱，纤维变细且排列稀疏，表明胶原纤维合成减少；表皮厚度变薄，角质层变厚。给药III组（图3）与衰老组（图2）比较，胶原纤维合成较模型组明显增加，表皮厚度增厚，角质层变薄；真皮层成纤维细胞数量增加。毕业论文4；讨论毕业论文老年动物饲养周期长，个

8、体差异大，不易获得。而青年小鼠长期注射D?半乳糖，由于其代谢产物半乳糖醇不能被进一步代谢而堆积在细胞内，影响渗透压，导致细胞肿胀，代谢紊乱，体内活性氧