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1、咲喃瞠酮对雄性大鼠避育机理探究【摘要】目的：研究咲喃哇酮对雄性大鼠睾丸细胞的药理作用。方法:按不同时间间隔，每日给大鼠灌喂20mg/ml咲喃瞠酮，然后取大鼠睾丸进行病理细胞分析；及停药后大鼠睾丸细胞的恢复。结果：咲喃哩酮对睾丸细胞有特异性的损伤，停药一定时间细胞的功能恢复。结论：咲喃呢酮使用的剂量和时间有量效关系。【关键词】咲喃哩酮；大鼠；睾丸TheFurazolidoneevadestothemalebigmousenurturesmechanism，sresearchDONGChun"eJilinProvincePopulationLifeScienceResear
2、chInstitute,Jilin130041,China[Abstract】Objectives：ThepurposeofstudyisthatFurazolidoneonmalerattestiscellsinpharmacology.Method：Accordingtodifferenttime-gap,dailytoratsfed20mg/mlFurazolidone,thentaketherattestispathologicalcellanalysis；Andaftertherestorationofrattesticularcells・ResuIts：Fu
3、razolidonetotesticlecellhasthespecificitydamagestopsthemedicinecertaintimecelVsfunctionrestoration.Conclusion：TheusedosageandthetimeofFurazolidonehavethequantityeffectrelations.［Keywords】Furazolidong；Rat；Testes咲喃哩酮［nitrofurazolidone,NFZ,N-(5-nitro-2-furfuylidene)-3aminiooxazolin-2-one］属于
4、硝基咲喃类化合物，是一种廉价的广谱抗生素［1］,主要适用于治疗菌痢、腹泻［2］。已知咲喃哩酮对人体的毒副作用包括恶心、呕吐、厌食、周围神经炎等，以及使先天性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏者易出现溶血性贫血［3］。相对的，硝酸咲喃类抗生素中的其他成员如咲喃妥因、咲喃西林等对人体的毒副作用还要大于咲喃哇酮。为进一步探讨咲喃哇酮对细胞的毒副作用机制，我们拟定了咲喃吐酮对大鼠睾丸的作用机制的研究，现报告如下。1材料与方法1.1材料成年雄性Wistar大鼠购于吉林大学动物饲养室，咲喃哩酮标准品由药检所提供，其他试剂均为国产分析纯。1.2方法成年雄性Wistar大鼠共22只，分6组，正
5、常2只为对照组，余下20只每4只为1组，每只重约250g,常规喂养。将咲喃口坐酮按20mg/ml用生理盐水溶解，其中20只按100mg/lg体重，每日灌喂1次。分别与开始用药后的12、24、48、72、96h随机将2只Wistar大鼠用乙瞇麻醉后断头，每组剩余2只备用，低温无菌条件下分离睾丸组织，大鼠的左侧睾丸，经甲醛固定、石蜡包埋、切片，用于原位末端标记检测,右侧组织迅速剥离包膜及脂肪组织，用灭菌的100目铜网将曲细精管磨碎，加入lml冷PBS,再用100目尼龙网制成单细胞悬液，用于梯度电泳鉴定。留下2只每日灌服生理盐水，并于96h后随用药Wistar大鼠一起麻醉后断
6、头，取组织进行2种检测。见表1。1.3梯状电泳鉴定(1)细胞用冷PBS洗2次，每次于1000转/min离心5min；(2)每106个细胞中，加入2(TC反应2h冷裂液(50mMTris-HCl,pH7.5,20mMEDTA,1%NP-4O)轻轻震荡10s后，1600转/min,离心5min；(3)JL清加入1%SDS,加入RnaseA至5ug/ul,56°C反应2h；(4)加入蛋白酶K至2.5pg/ul,37°C反应3h；(5)加入1/2体积的10M乙酸铁,2.5倍体积的预冷无水乙醇，室温放置lOmin；(6)10000转/min,4°C离心lOmin,用75%乙醇洗沉
7、淀2次，空气干燥，重溶于20ulTE中；⑺取10ul电泳，电泳条件：0.5XTBE电泳缓冲液(45mMTris-borate,2mMEDTA),室温、恒压50V电泳l・5h后，加入2lig/n1EB中染色，去离子水中脱色lh至过夜,观察、拍照留下试验结果。1.4原位末端标记检测(1)实验用玻片预选用0.01%多聚赖氨酸或其他防脱片石蜡切片：用10%中性缓冲福尔马林41过夜固定，较低温度«60°C)下浸蜡、包埋、切片，检测前切片常规脱蜡入水；(2)用0.01MPBS(pH7.4)稀释蛋白酶K处理过样品片上室温放置10〜30min；(3)室温
