动植物检疫实验指导书

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1、动植物检疫实验指导书《动植物检疫》实验指导书苏立新编实验二粗氨的测定1.原理：氨和胺类化合物是肉变质腐败时所产牛的特征产物，它能够与纳斯勒氏试剂在碱性环境中生成不溶性的复合盐沉淀一一碘化二亚汞镀（橙黄色），颜色的浓淡和沉淀物的多少取决于肉中的氨和胺类化合物的量。该反应对游离氨或结合氨都能进行测定。反应式如下：2HgCI2+4KI->2Hgl2+4KCI2Hgl2+4KI+3KOH+NH3—HgOHgNH2l+2H2O+7KI2.纳斯勒氏试剂：称取10g碘化钾，溶解于10ml热蒸憾水中，陆续加入饱和氯化汞溶液（HgCI2在20°C时100ml水中能溶解6.1g）,不断振摇，直到产生的朱

2、红色沉淀不再溶解为止。然后向此溶液中加入35%氢氧化钾溶液80ml,最后加入无氨蒸镭水将其稀释至200ml,静置24h后，取上清液作为试剂。移于棕色瓶中，塞上橡皮赛，置阴凉处保存。3.仪器：试管、吸管、试管架、棕色瓶4.操作方法：（1）肉浸出液的制备：用挥发性盐基氮测定时所制备的（1：(2)10）肉浸出液。具体操作：取2支试管，1支加入lml肉浸出液，另一支加入lml煮沸2次冷却的无氨蒸馆水做对照，然后向其屮各滴入纳斯勒氏试剂，每加1滴振摇数次，并观察颜色的变化。一直加到10滴为止。5.判定标准：纳斯勒氏试剂反应结果判定如下：实验三球蛋白沉淀反映1.原理:肌球蛋白也称肌凝蛋白,是构成

3、肌纤维的主要蛋白质,他易溶于碱性溶液中，在酸性环境中则不溶解。当肉腐败变质时，由于肉中氨和盐胺类等碱性物质的蓄积，肉的酸度减小，pH值升高，使肌肉中球蛋口呈溶胶状态，在重金属盐（如硫酸铜）或者（如醋酸）的作用下发生凝结而沉淀。2.试剂：（1）10%醋酸溶液：量取10ml醋酸，加蒸倔水至100ml,混匀。（2）10%硫酸铜溶液:称取五水硫酸铜（CuSO4•5H2O）15.64g,先以少量蒸饱水使其溶解，然后加蒸馅水稀释至lOOmlo3.仪器：试管、试管架、吸管、水浴锅4.操作方法(1)肉浸液的制备：同挥发性盐基氮所用的肉浸出液（1：10)(2)具体操作醋酸沉淀法：向试管中加入肉浸液2m

4、l,加10%醋酸2滴，将试管置于80°C水浴3min,然后观察结果。5.硫酸铜沉淀法：向试管屮加入肉浸液2ml,力口10%硫酸铜溶液5滴,振摇后静置5min,然后观察结果。判定标准：新鲜肉：液体清亮透明；次鲜肉：液体稍浑浊;变质肉：液体混浊，并有絮片或胶冻样沉淀物。实验四硫化氢的测定1.原理：构成蛋口质的氨基酸中，半胱氨酸和胱氨酸含有疏基,在细菌酶的作用下能形成硫化氢，硫化氢与可溶性铅盐作用时，形成黑色的硫化铅。此种反应在碱性环境下进行，则能提高反应的灵敏度。因此，测定肉中的硫化氢时，常将醋酸铅碱性溶液作为直接点肉发或滤纸法的试剂。其反应式如下H2S+Pb（CH3COO）2->PbS

5、I+2CH3COOH2.试剂：醋酸铅碱性溶液：在10%醋酸铅液内加入10%氢氧化钠溶液，直到析出沉淀为止。3.仪器：100ml具塞锥形瓶、定性滤纸4.测定方法和结果判定：（1）醋酸铅滴肉法：将醋酸铅碱性溶液直接滴在肉面上，2-3min后，观察反应。正常新鲜肉无变化；腐败肉滴上试剂后就能出现褐色或黑色反应。此法灵敏度高，简单易行，便于在市场上检验肉品时使用，作为综合判定的参考。（2）醋酸铅滤纸法：将被检肉剪成绿豆或黄豆粒大小的肉粒，放入100ml带塞的三角烧瓶中，使之达到烧瓶容量的1/3,铺平在瓶底。瓶中悬挂经醋酸铅碱性溶液润湿过的滤纸条，使之略接近肉面（但不接触肉面），另一端固定在瓶

6、颈内壁与瓶塞之间。在室温下放置15min后，观察瓶内滤纸条的变色反应。新鲜肉：滤纸条无变化；次鲜肉：由于硫化铅的形成，滤纸条边缘变为淡褐色；变质肉：由于硫化铅大量形成，滤纸条变为黑褐色或棕色。（3）滤纸贴肉法：用一条浸过醋酸铅碱性溶液的滤纸条，直接贴在肉切面上，有硫化氢时，纸条变为褐色或黑色。实验七油脂氧化酸败的定性检验1.试验原理油脂氧化酸败的过程是极其复杂的化学变化过程，对食品质量影响很大。酸败的油脂中某些分解产物对人体有害，例如环氧丙醛。过氧化物是油脂自动氧化的主要初级产物，过氧化物可进一步分解，生成低级的醛、酮和竣酸，通过油脂中过氧化物、醛类的检出，可定性判断油脂是否己发生酸

7、败。（1）过氧化物和饱和碘化钾溶液作用，析出的碘再用淀粉溶液来检验。（2）环氧丙醛在酸败的油脂中不呈游离状态，而是成为缩醛。在盐酸作用下，他逐渐释2.出，释出的游离环氧丙醛与间苯三酚发生缩合反映，生成红色的凝聚物（环氧丙醛■间苯三酚凝聚物），由红色凝聚物的生成可判断油脂已发生酸败，此方法现象明显，简单易行。实验器材：恒温水浴、锥形瓶、试管及试管架、量筒、电子天平、胶塞、玻璃管。花生油、猪脂肪（新鲜与不新鲜各1种）。3.实验试剂：(1)氯仿■冰乙酸混合液：取