YCT《白肋烟烟碱转化株鉴定规程》

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1、YC/T《白肋烟烟碱转化株鉴定规程》编制说明1工作简况1.1任务来源；该项目来源于国家烟草专卖局文件国烟科〔2013〕115号《国家烟草专卖局关于印发2013年度烟草行业标准制修订项目计划的通知》。1.2项目承担单位、协作单位及主要分工；该项目牵头单位为国家烟草栽培生理生化研究基地，协作单位包括中国烟草白肋烟试验站、四川省烟草公司、云南省烟草公司大理州公司和云南省烟草农业研究院。各单位任务分工如下：序号单位名称项目联系人任务分工1国家烟草栽培生理生化研究基地史宏志主持该标准项目，制定方案，项目实施，

2、起草标准2中国烟草白肋烟试验站李进平项目实施，标准验证，标准应用3四川省烟草公司杨兴有项目实施，标准验证，标准应用4云南省烟草公司大理州公司徐发华项目实施，标准验证，标准应用5云南省烟草农业科学研究院雷丽萍项目实施，标准验证，标准应用1.3主要工作过程（起草、试验验证、征求意见、送审、报批等环节及项目研讨会等内容）；该项目任务下达后，按照合同约定，制定了项目实施方案。各承担单位积极开展了研究工作。国家烟草栽培生理生化研究基地初步起草了白肋烟烟碱转化株鉴定标准，并与四川省烟草公司和云南省烟草公司大理州

3、公司联合进行标准的试验和验证，通过在大田设置田间试验比较不同鉴别标准对降低后代群体烟碱转化株和烟草特有亚硝胺含量的效果，取得预期结果，证实了该标准的科学性和有效性。中国烟草白肋烟试验站和云南省烟草农业研究院也采用该标准对所选育的白肋烟品种进行验证，取得了较好的应用效果。在试验验证的基础上，我们对标准草案进行了修改，以使标准更具操作性和实用性。下一步，计划将标准草案在更广的范围内征求意见。1.4标准主要起草人及其所做的工作等。标准起草人为史宏志、杨兴有、李进平、徐发华、雷丽萍、杨惠娟、杨永霞、刘国顺、

4、覃克炳、孙军伟、陈志华、李宗平、靳冬梅。其中史宏志、杨兴有、徐发华、李进平、雷丽萍、杨惠娟、杨永霞、刘国顺主要进行标准的研究方案制定、试验研究及标准验证，其他人员主要进行了标准的验证和应用工作。2相关领域的国、内外标准研究和制修订情况白肋烟是生产混合型卷烟的重要原料，但白肋烟普遍存在烟碱向降烟碱转化问题，国内外围绕烟碱转化问题开展了系统研究。（一）美国自上世纪末开始进行烟碱转化研究，主要包括不同品种转化株的比例和分布，转化株的早期诱导和鉴别方法，白肋烟品种烟碱转化性状的改良，生产低烟碱品种种子（LC

5、）,烟碱转化基因的调控等。Bush等和史宏志等的研究表明，美国白肋烟品种一般在群体中含有15-20%的转化株，其中约一半转化株的烟碱转化率在20%以上。烟碱转化主要发生在调制过程的前3个星期，变黄末期后变化较小。烟碱转化由显性基因控制，白肋烟烟叶衰老过程中的烟碱转化是细胞色素P450类的CYP82E4基因显性表达的结果，转化基因编码形成烟碱去甲基酶，其催化烟碱向降烟碱的转化。（二）2004年我们在国家烟草专卖局立项开展“烟草烟碱转化及生物碱优化技术研究”，2007年在四川省烟草公司立项开展“四川优质

6、白肋烟生产理论与技术研究与应用研究”，2009年在云南省烟草公司立项开展“云南宾川优质白肋烟技术开发与应用研究”。经过近些来的系统研究，明确了我国不同产区、不同品种存在的烟碱转化问题，烟碱转化株早期诱导和鉴别技术，烟碱转化性状遗传变异规律，对我国主要白肋烟品种鄂烟一号、达白一号、达白二号等进行了系统改良，培育出了相应的改良杂交种，取得了显著的增质减害效果。（三）为了从烟草群体中有效地鉴别和去除转化株，我们研究发明了采用2-氯乙基磷酸处理或碳酸氢钠处理方法诱导转化株的烟碱转化性状在开花前表达的方法。烟

7、叶处理后晾制的温度对转化株的烟碱转化有较大的影响，在35-3VC时为最佳。乙烯利和碳酸氢钠的浓度对诱导转化株烟碱转化的效果有很大影响，试验表明乙烯利的处理浓度以0・3%为宜，碳酸氢钠对烟草早期幼叶以0.8%最为适宜，对烟株生长中期烟叶以1%最适。通过诱导可使转化株的转化性状充分表达，再通过分析测定生物碱的组成和含量，计算烟碱转化率。（四）在单株选择过程中，需要对转化株的判别制定标准，以科有效鉴别转化株和非转化株。2003年以前，国际上一般把烟碱转化率（降烟碱含量占降烟碱和烟碱含量之和的百分率）大于5

8、%作为转化株的标准，近些年来美国已降低到了3%,但仍没有科学依据，主要是根据经验判断。我国目前上缺乏育种和制种过程中转化株的鉴别标准，在实际操作中一般按烟碱转化率大于3%或5%作为判别转化株的标准，由于缺乏科学性，一些转化株不能有效鉴别，制定严格和科学的标准十分必要。3标准编制原则及主要内容确定的依据3.1标准适用范围；本标准规定了白肋烟烟碱转化株的早期鉴定规程和确定转化株的标准。本标准适用于白肋烟育种和制种过程中，在烟株开花前对烟碱转化株进行鉴别，以有效去除烟碱转化