食品微生物检验人员操作规范

《食品微生物检验人员操作规范》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、食品微生物检验的质量控制李天添目录n实验室常用仪器设备的管理、使用、灭菌与维护n培养基的质量控制（储存、制备、使用、质量控制、性能测试）n检验环境保证（实验室、无菌室）nGB4789.1-2010的要求仪器管理n建立设备档案n建立设备维护、维修规程n建立设备使用记录n定期进行校准和检定–加贴三色标识：•合格：绿色•限用：黄色•停用：红色仪器设备保证培养箱的使用(ISO72184.6)n温度恒定，波动不超过±1°C；n步入式(Walk-in)培养室很难将温度控制到小于±2°C(FSIS)；n如果周围温度接近或高于培养箱温度，培养箱内有必要安装制冷系统；n培养箱外壁要避免阳光的直

2、射；n无论哪种类型的培养箱，都不能一次将培养箱充满；n注意箱内空气流通，平皿或试管离培养箱内壁距离不小于25mm，平皿叠放不超过6个，每叠间距至少25mm；(但厌氧培养时可能有必要平板叠放超过6个*)培养箱的维护(ISO72184.6)n培养箱温度每个工作日至少检查一次，为此培养箱内至少安装一支温度计，它的测量头要置于含甘油的密封瓶中。n培养箱每年清洗和消毒二次(FSIS)；n如果培养箱内需要添加盛水容器来保持湿度，水中可以加入非挥发性的抑制剂来防止微生物的累积，容器要每月清洗和消毒(FSIS)。仪器设备保证物理灭菌方法干热灭菌n对象：空玻璃仪器、金属器具。不能用于带橡胶的物

3、品、液体及固体培养基；n条件：160°C,2h，其它组合见下页；n如果烤干玻璃仪器，120°C，30min即可；温度降至50~60°C方可打开箱门。n灭菌样品从灭菌之日起，一周内使用有效，逾期重新灭菌。物理灭菌方法n干热灭菌180180oCC00..5h5h170170oCC11hh160160oCC22hh150150oCC22..55hh140140oCC33hh121121oCC66hh干燥灭菌箱温度控制n干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息：开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间（或关闭时间）。n干燥灭菌箱的温度校准；用参考温度计进行温度测试。n干燥灭菌箱温度

4、要求与精确度：160±5°C或180±5°C。n干燥灭菌箱校准周期为半年。物理灭菌方法湿热灭菌n巴氏消毒法61.1~62.8°C,30min;72°C,15~30s.n煮沸消毒法细菌营养体，15~30min可杀死；芽孢，1~2h杀死；如在沸水中加2%~5%苯酚，5~10min可杀死芽孢；如在水中加10g/L碳酸氢钠，可提高沸点，且可防止金属器材生锈。物理灭菌方法湿热灭菌－高压蒸汽灭菌n适用于耐高温且不怕蒸汽的物品条件为121°C,15~20min.含糖的培养基采用115°C、10~15min灭菌*n高压灭菌的液体培养基最大体积为1L,琼脂培养基为200ml*;n总的暴露时间不

5、可超过45min*;n灭菌样品从灭菌之日起，5天内使用有效，逾期重新灭菌*。灭菌锅的使用n一次灭菌过程中，干净器皿、试剂不能和用过的器皿、试剂一起灭菌；n校正和确认(FSIS)每周一次用生物指示瓶/条加到满载的灭菌锅内检查；灭菌过程监控生生物指物指示剂示剂n高抗力细菌芽孢嗜热脂肪杆菌芽孢B.stearothermopilus灭菌锅的使用n校正和确认(FSIS)温度敏感的灭菌指示带贴在所有灭菌器皿上来确保灭菌彻底；灭菌过程监控暴露控制包包外化外化学学指示剂指示剂::压压力蒸力蒸汽汽、干热、干热灭菌过程监控包包裹控制裹控制包包内化内化学学指示剂指示剂::压压力蒸力蒸汽汽、干热、干

6、热灭菌锅的维护(FSISMLG36.21)n校准周期一般为半年。每半年要由专业人员维护。另外，每台灭菌锅每年要用认可的温度计进行温度确认实验及温度一致性检验；n精确度要求*：110°C±2°C，115°C±2°C，121°C±2°Cn灭菌锅蒸气管的滤器要每周检查清洗；n灭菌锅要保持干净并无残留物以保证最大热传递；n保存每台灭菌锅进行的操作和温度验证的日志；n主管每周检查日志以确保记录准确、完整。物理灭菌方法n过滤除菌法不耐高温或化学药品灭菌的药液、毒素、血液等。使用膜(过滤物质孔径0.22mm)；过滤器材及膜要在121°C灭菌15min。n紫外线杀菌波长200~300nm有杀

7、菌作用，以253.7nm最强。用紫外线照射灯，距离1.5~2m，照射1m2区域，30min可达无菌。紫外照射消毒《消毒技术规范》n30W紫外灯在垂直1m处辐射强度高于70mW/cm2；n平均每立方米不少于1.5W，如60m3房间需安装30W紫外灯3只；n分布均匀、吊装高度距离地面1.8-2.2m;n悬吊紫外灯连续照射时间不少于30min，可使静态空气达到消毒要求。紫外灯的控制n仪器测试法通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射物1米处，要求其强度³90μW/cm2(新灯