细菌荚膜多糖的分离纯化研究进展

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1、万方数据·72·微乍物学免疫学进展2012年第40卷第2期ProginMicrobiollmmunolApt．2012，V01．加．No，2细菌荚膜多糖的分离纯化研究进展赵海平综述；赵志强，谢贵林审校(兰州生物制品研究所有限责任公司，兰州730046)·综述·摘要：荚膜多糖是细菌的保护性抗原和毒力因子，也是细菌疫苗最重要的靶抗原之一，其分离纯化是制作疫苗的首要步骤。本文从去除菌体、收集总糖、去除菌体核酸和蛋白质、去除内毒素等基本工艺步骤，对现有的工艺和目前的工艺进展进行了综述，重点阐述厂中空纤维、深层过滤、超滤、酶水解、柱层析等方法在荚膜多糖分离纯化中的应用进展。关键词：

2、荚膜多糖；分离纯化；疫苗中图分类号：Q539文献标志码：A文章编号：1005．5673【2012)02-0072—07ProgressinisolationandpurificationofbacterialcapsularpolysaccharideZHAOHai—ping‘，ZHAOZhi—qiang，XIEGui—lin【‘LanzhouInstituteofBiologicalProductsc。．Lid，Lanzhou730046，China)Abstract：Capsularpolysaccharideistheprotectiveantigenandviru

3、lencefactorof80mebacteria，whichisalsooneofthemostimportanttargetantigenofbacterialvaccine．Itspurificationisthepfimarystepofvaccinedevelopment．Thisreviewsummarizedtraditionalandadvancedtechnologiesofprogressinisolationandpurificationofbacterialcapsularpolysaccha-ride，startingwithbasictechn

4、ologystepsofremovingceHs，collectingcapsularpolysacchafide。removingnucleicacidandprotein，removingendotoxin。ere．AndthereviewparticularlydiscussedprogressinpurificationtechniquesofhoHowfiber。depthfiltration-membranefihration，enzymehydrolyzation。columnchromatography，and∞on．Keywords：Capsularpo

5、lysaccharide；Purification；Vaccine荚膜多糖是大分子物质，分离制备比单糖和小分子寡糖更加复杂。荚膜多糖的分离纯化中，杂质主要有核酸、蛋白质、内毒素等物质。另外，许多细菌能分泌黏性多糖，也很难与荚膜多糖分离开来，影响荚膜多糖的纯度。荚膜多糖的分离纯化需要根据其生物学、化学等特性综合考虑。目前国内上市的含荚膜多糖的疫苗基本上都是沿用传统的方法，但随着2010版《中华人民共和围药典》三部标准的提高，这些方法的不足之处逐渐暴露出来。本文就荚膜多糖分离纯化的新进展进行了综述。1细菌荚膜的特征1．1细菌荚膜的生物学特征产荚膜细菌包括流感嗜血杆菌、脑膜炎球

6、菌、肺收稿日期：2012-01．05；修回日期：2012-03．13作者简介：赵海平(1985-)，男，硕士研究生，主要从事细菌性疫苗的研究工作。通信作者：谢贵林，Entail：guilxiel956@gmail．com炎球菌、大肠杆菌和假单胞菌等，可引起人类多种疾病。荚膜分为大荚膜、微荚膜和黏液层，是细菌细胞壁外的一层黏液性物质。大荚膜与细胞壁结合十分牢固，厚度／>0．2斗m，如肺炎双球菌；微荚膜与细胞壁结合牢固，厚度<0．2岬，如伤寒沙门菌的Vi抗原；黏液层疏松黏附于细菌表面，边界不明显而且容易被洗脱。荚膜的主要成分是多糖，例如流感嗜血杆菌；少数为多肽，例如炭疽芽胞杆

7、菌、鼠疫杆菌等；有些也包含脂类或脂类蛋白复合体。荚膜是带荚膜细菌的主要毒力因子之一，可以使细菌逃避人体的非特异性防御机制，主要体现在三个方面。一是荚膜处于细菌最外层，可有效保护菌体免受或少受多种杀菌、抑菌物质如溶菌酶、补体等的损伤；二是荚膜具有黏附作用，不仅使细菌彼此问黏连，而且有利于黏附到组织细胞表面，是引起感染的重要因素，例如具有荚膜的S型肺炎链球菌比没有荚膜的肺炎链球菌毒力强，有助于肺炎链球菌侵袭人体；三是荚膜由于有亲水性及空间占位作用，万方数据微生物学免疫学进展2012年第40卷第2期P”ginMicwbiolImmu