生物必修一实验整理

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1、实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二.实验原理:1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。2.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。三.方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮载玻片要洁净,滴一滴质量分防止污迹干扰观察效果细胞制片保

2、持细胞原有形态数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞消毒为防止感染,漱口避免取材失败将载玻片在酒精灯下烘干固定装片(细胞已死亡)水解改变细胞膜的通透性,加速染色剂进将烘干的载玻片放入质量分数为8%入细胞,促进染色体的DNA与蛋白的盐酸溶液中,用300C水浴保温质分离而被染色5min冲冼涂片洗去残留在外的盐酸用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上两种溶液混合,现配现用染色5min观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽使观察效果最佳浅的区域,移至视野中央,调节

3、清晰后才换用高倍物镜观察实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。如:加热葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O,即Cu(OH)2被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。3.蛋白质

4、与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性2+NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu作用,产生紫色反应。)三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO

5、4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。五、方法步骤:(一)可溶性糖的鉴定操作方法注意问题解释苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,1.制备组织样液。组织液很易被氧化成褐色,(去皮、切块、研磨、过滤)将产生的颜色掩盖。2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。应将组成斐林试剂的甲液、乙液斐林试剂很不稳定,甲、乙3.向试管内注入1mL新制分别配制、储存,使用前才将甲

6、、液混合保存时,生成的Cu的斐林试剂,振荡。乙液等量混匀成斐林试剂;0(OH)2在70~90C下分切勿将甲液、乙液分别加入苹果解成黑色CuO和水;组织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。最好用试管夹夹住试管上部,使防止试管内的溶液冲出试04.试管放在盛有50-65C试管底部不触及烧杯底部,试管管,造成烫伤;口不朝向实验者。温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)(二)脂肪的鉴定操作方法注意问题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子因为浸泡时间短

7、,不易切片,干种子要浸泡3~4小叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴浸泡时间过长,组织较软,切中,用吸水纸吸去装片中的水。时,新花生的浸泡时下的薄片不易成形。切片要尽间可缩短。可能薄些,便于观察。染色时间不宜过长。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。用吸水纸吸去薄片周围染液,用酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的50%酒精洗去浮色,吸去酒精。观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。1~2滴蒸馏水,盖上盖

8、玻片。低倍镜下找到花生子叶薄片的最装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇薄处,可看到细胞中有染成橘黄色中。或红色圆形小颗粒。三、蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。黄豆浸泡1至2天,容易研(浸泡、去皮研磨、过滤。)磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。2+鉴定。加样液约2ml于试管A液和B液也要分开配制,先加NaOH溶

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