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时间:2019-11-24
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1、金黄色葡萄球菌的检验2009.11.10金黄色葡萄球菌的概述金黄色葡萄球菌(StaphyloccocusaureusRosenback)是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)可引起多种严重感染。主要生物学特性1、形态染色典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列单个或成对和成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。2、培养特征金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度30~37°C,最适生
2、长pH7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10~15%NaCl肉汤中生长。主要生物学特性3.生化反应可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶,触酶阳性。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,耐干燥,对磺胺类药物敏感性低,对消毒剂不敏感。但对青霉素、红霉素等高度敏感。主要生物学特性5、致病性金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引
3、起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭酶:a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶关;d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依
4、据鉴定金黄色葡萄球菌;e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种血清型。肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的机会很多。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个
5、世界性卫生难题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒,占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占到45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。流行的特点季节分布:多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。污染食品的途径:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装
6、不密封,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。实验目的掌握金黄色葡萄球菌基本检验的程序。熟悉金黄色葡萄球菌检验的方法与步骤。掌握金黄色葡萄球菌主要的生物学特征。掌握微生物无菌操作技术。检验程序待检标本于7.5%NaCl或胰酪胨大豆肉汤增菌液37℃培养血平板和Baird-parker划线分离增菌分离培养纯培养确证试验血浆凝固酶试验甘露醇试验观察菌落特征,革兰染色琼脂斜面和肉汤培养基耐热核酸酶试验肠毒素测定KIA斜面37℃16~20h结果观察1、金黄色葡萄球菌溶血现象2、
7、普通营养琼脂平板上菌落形态3、接种KIA4、革兰染色镜检5、生化鉴定
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