微生物快速法测定BOD项目探究及探析

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1、微生物快速法测定BOD项目探究及探析随着环境保护事业的蓬勃发展，各级环境监测部门加强了对水体中有机污染状况的监测，其中BOD项目的监测作用是其他项目无法替代的。在各项科学严谨的质量管理体系下,在实验室质控手段完备的条件下，本文以HJ/T86-2002《微生物传感器快速测定法》作为检测标准，对各行业实际样品进行监测分析，指出了该方法的影响因素、注意事项及应用范围，并阐述该方法存在的问题和解决方法。一、仪器与试剂(—)仪器本文所使用的仪器是220B型BOD快速测定仪(天津赛普环保科技发展有限公司L(%1)试剂1.磷酸

2、盐缓冲溶液(0・5mol/L):68g磷酸二氢钾和71g磷酸氢二钠用蒸馆水溶解后移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线。2.磷酸盐缓冲溶液使用液(0・005mol):用上述溶液稀释100倍。（2500±37mg/L）:称取在103°C下干燥1小时并冷却至室温的无水葡萄糖和谷氨酸各1.705g，融于磷酸盐缓冲溶液使用液，并用此溶液稀释至1000ml,混合均匀。二、实验部分（一）数据经过实验室大量实验数据的比对，与稀释接种法的比较数据如下表1所示。在大量样品分析的基础上（见表1），与标准稀释法相比,微

3、生物传感器快速测定BOD法具有以下特点。一是操作易行、监测时间短。微生物传感器快速测定BOD的测量时间是8min,清洗时间是25min,能迅速反映水质情况，以实现快速监测。二是标准稀释法所需时间长，并且实验步骤中难免出现人为或客观条件出现误差，影响数据准确度。而微生物法中机器对温度控制的精度好（温度设置为33°C）,实验过程全部在恒温条件下监测，避免了硝化作用产生的影响。三是对可生化性好的水样测定稳定，重现性好。与标准稀释法5d的培养过程相比，微生物快速法测定可生化性好的水样时，BOD数值比较稳定，精度高，避免了

4、标准稀释法的一系列监测数据偏差。同时，微生物快速法测定BOD也存在以下几个问题。一是当监测的实际样品中含有毒有害物质（如农药类、高浓度杀虫剂、游离氯废水等）时，会减少甚至杀死微生物菌种。因此，此类水样不适用此方法测定。二是当样品中悬浮物达到一定浓度时，会干扰样品的测定，影响数值的准确度。此时，应在样品静置30分钟后，再取中间液进行分析。三是此方法测定BOD项目，主要依靠生物膜内的微生物菌种活性，菌种的活性在实验过程中起关键作用。在关注菌种生存周期的基础上，根据实际样品的实际情况合理使用标准物质进行标准定点工作。（

5、二）微生物膜的活化及更换将菌膜放入0.005mol/L缓冲溶液中活化一周左右，其活化过程应在温度保持219左右的恒温恒湿箱内进行，然后将其安装在微生物传感器上。菌膜上的菌种作为活性物质是有寿命的，除温度、湿度影响其寿命以外，主要受使用频率、水样污染程度、使用期间的维护和保养等的影响。当遇到以下情形时须更换生物膜：一是连续正常工作30天以上；二是验证标准溶液的监测数据的灵敏度下降；三是正常的菌种被伤害或是被杀死；四是菌膜正常工作后连续停机7天以上。当机器使用频率低时，必须保证每周用缓冲溶液清洗机器次。在保证初始电位

6、在4~10之间时可持续使用菌膜。灵敏度是衡量生物膜工作是否正常的标准，若灵敏度数值在下降，则需及时更换生物膜。（三）标准系列的确定微生物的菌种与待测水样（非有毒有害的）存在"共生”关系。样品的BOD浓度影响微生物的活性，样品通过微生物监测获得BOD浓度值。为保证监测结果的准确性，一般用两点定标进行分析。根据不同行业和来源的水样，总结归纳并选择相应适合的控制浓度电位进行定标工作，并且每个工作日至少定标一次。根据样品的实际情况，有条件的可以选择每批次样品定标一次或多次，以确保数据准确。在机器正常运行且菌膜活性良好的条

7、件下，经大量实验得到一组样品浓度与之相对应电位值数据（见表2b数据仅供参考。若样品浓度相对应的电位值降低10%,可作为更新菌膜的依据。（四）管路的更换当蠕动泵进样速度不为匀速时，可能是管路老化造成的,此时应考虑更换管路。当监测工作密度加强，管路中必然存留微生物，从而导致管路液体流速下降。根据仪器要求需定期更换管路。管路更换时间与机器的使用频率、水样的来源及污染程度，以及管路的材质等均有关系。因此，在日常维护中，在保证数据的准确的前提下，可依据仪器使用频率和水样的污染程度等更换管路。当标准样品分析数据的精密度下降时

8、即可更换管路。（五）干扰物质的控制表3介绍了几种干扰物的最大限量，通过对大量样品反复实验，在保证测量结果准确性的前提下，列岀较适宜的低于最大限值的标准规定值。含0.5mg/L以下的游离氯一般对数据的结果不会产生明显的干扰，而且还能对管路、流通池、膜有一定的清洗作用。含高浓度的游离氯的样品可加入1.575mg/L的亚硫酸钠溶液（不宜过量，否则产生负干扰）,使游离氯或结合氯去