抗肿瘤药物的研究

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1、摘要：冃的：探讨肉豆蔻种仁不同提取部位抗肿瘤的活性作用，为研究该药提供实验数据。方法：设计了2种提取方案，以系统溶剂法进行提取后，将2种方案中80%醇提浸膏以乙酸酯萃取，共得到13个提取部位，并以这13个提取部位作为受试样品，采用MTT比色法，分别对人白血病细胞系HL60、人胃癌细胞系BGC823.人乳腺癌系MDAMB435进行生长抑制实验；以细胞抑制率及IC50为指标，考查抗肿瘤活性。结果：经乙酸乙酯萃取后的乙酸乙酯可溶部分及方案一中的水提部位，对于上述细胞系的生长抑制效果较好。结论：经乙酸乙酯萃取示的乙酸乙酯可溶部分浸膏及及方

2、案一屮的水提部位具有明显的抗肿瘤效果。关键词：肉豆蔻；抗肿瘤StudiesontheantitumoractivityofNutmegZHANGJing,Rena,DUNiansheng,etal（DepartmentofPharmacognosyCollegeofPharmacy,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China）Abstract:Objectives:TostudyonantitumoractivityfractionsofNutmeg.Methods:Wedesigne

3、dtwoextractiveprogramme,andextractedwithdifferentsolvents,thengot13fractions.Thesefractionsweretestedforantitumoractivityuponthreekindsoftumorcells:HL60,BGC823,MDAMB435.Results:Basedontheexperimentalresult,ItshowedthatEtOAcextractedfractionandwaterextractedfractioncan

4、inhibitthreekindsoftumorcellsgrowth.Conclution:ExtractedfractionbyEtOAcandwaterextractedfractioninprogrammehavesignificantantitumoractivity.Keywords:Nutmeg（MyristicafragransHoutt）;antitumoractivity维吾尔药肉豆蔻为肉豆蔻科植物肉豆蔻（MyristicafragransHoutt）^去假种皮及种皮的干燥成熟种仁。始载于唐《本草拾遗》，味辛，

5、性温。归脾、胃、大肠经。据报道其具有抗肿瘤作用［2］和中枢抑制作用、抗炎作用［3］。本实验设计了2种提取方案，对该药的不同部位进行提取，得到13个捉取部位，并对这13个捉取部位进行了抗肿瘤的活性筛选工作，旨在研究该药的抗癌有效部位，为今后研究该药的作用捉供实验数据。1材料与方法材料药材：肉豆蔻购于新疆维吾尔医医院，甜种由新疆医科大学药学院天然药化教研室刑文斌老师鉴定。受试物:上述肉豆蔻按照2种方案提取后所得的各部浸膏，共13个样品。瘤株：人白血病细胞系HL60、人胃癌细胞系BGC823.人乳腺癌系MDAMB435均由北京大学医学部

6、犬然药物及仿生药物国家重点实验室提供。1.2仪器与试剂旋转蒸发仪RE52A（上海亚容生化仪器厂），DKS24数显电热恒温水域锅（江苏省金坛市医疗仪器厂），SHIII循环水式多用真空泵（郑州长城科教有限公司），石汕瞇（60-90°C）（分析纯），氯仿（分析纯），乙酸乙酯（分析纯），甲醇（分析纯）；倒置显微镜，酚标仪，二氧化碳温箱，四甲基偶氮唯蓝(MTT),RPMI1640培养基(干粉)，L谷氨酰胺，小牛血清，56°C30min灭活。RPMI1640培养液，细胞消化液。［4］。1.3提取分离首先将肉豆蔻分为2批，分别采用方案一、方案二

7、提取。方案一：肉豆蔻进行水蒸气蒸憎提取挥发汕，其残渣晾干示分别以氯仿、乙醇(80%)、水(80°C)冋流提取。分别浓缩提取液，回收有机溶剂，将各部所得的浸育收集，称重，备用。然后将80%醇提浸肓以乙酸乙酯萃取,所得浸育称重，备用。方案二将肉豆蔻依次以石汕讎(60~90°C)、氯仿、乙醇(80%)、水(80°C)回流提取，分别浓缩提収液，回收有机溶剂，将各部所得的浸膏收集，称重，备用。然后将80%醇提浸膏以乙酸乙酯萃取，所得浸膏称重，备用。1.4方法1.4.1细胞接种取处于指数生长期的培养细胞［5］,消化后离心，以含小牛血清的RPM

8、I1640液调整细胞浓度，使每孔加入的细胞量为5000〜40000/孔。在37°C、100%湿度、5%二氧化碳的培养箱预培养24h。空口对照：只加完全培养液，不加细胞。对照组：加完全培养液与细胞，但不加受试药物。1.4.2受试药物以10倍稀释，做3