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时间:2019-11-23
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1、大鼠脑出血血肿周围半暗带及其时间窗探中图分类号:R743.3文献标识码:A文章编号:1009_816X(2010)04_0270_03DOI:10.3969/j.issn.1009_816X.2010.04.07ExploretheIntracranialHematoncusPenumbraandTimeWindowinRats.TIANWei,ZHAOQiang,GAOChang,etal.DepartmentofNeurology,Ningbodevelopmentzonescentralhospital,Zhejiang315800,China[Abstract]Obje
2、ctiveTostudypenumbraofperihematomaandthetimewindowinratmodelofintracerebralhemorrhage・MethodsWeusedcoagulatedautologousbioodtoestablishtheratmodelofintracerebralhemorrhageandemployedTTCandHEstainingtoidentifynormaltissue、ischemictissue、andnecroticfoci・Theischemicscopeandnecroticscopewereanal
3、yzedquantitativelybyimageanalysistechnique.Furthennore,thetimewindowofperihematomapenumbraareawasdeterminedbystatisticalanalysisofperihematomapenumbraareaatdifferenttimegroups・ResultsItsuggestedthatpenumbraindexwouldgraduallyreducewiththeincreaseofposthemorrhagetimeaccordingtogroupsof2h、3h、4
4、hand6hinratmodelofintracerebralhemorrhage,thepenumbraindexwassignificantlylowerin6hgroupthanin2hand3hgroups(P<0.01).ConclusionsTherewasapenumbraroundthehematoma,thetimewindowsofpenumbrawas4hours.[Keywords]Intracerebralhemorrhage;Penumbraofperihematoma;Timewindow;Rats缺血半暗带的概念最早由Astrup于1977年提出
5、[1]。其主要特征为缺血性、可逆性、存在的时限性即时间窗。本文旨在探讨脑出血血肿周边脑组织随着出血时间的不同是否存在着类似脑梗死病理变化的半暗带,并进一步探讨其时间窗。1材料与方法1.1动物模型:实验动物选择清洁级SD大鼠,(由复旦大学动物实验科学部提供)体重210〜240g,采用配对设计,分成4组(2小时、3小时、4小时及6小时,每组10只,每组中有一只来源于同一窝别,体重相似,配成对子),6小时组与其它组进行两两比较。另取SD大鼠6只,编入假手术对照组。1.2实验方法:1)大鼠用10%水合氯醛腹腔内麻醉(4uL/g),完成立体定向术后仰卧位固定,暴露并分离右侧股动脉,结扎远
6、心端。lOOuL自体动脉血抽入0.25ml注射器中,结扎股动脉近心端。2)血液在注射器中静置5〜10分钟使之凝固;外置套管用7号注射针头改制,距针尖6mm处焊锡,内置管为4号注射针头,头端均磨钝平,并保障通畅;栓子用4号针头改制。注射时应用瞬间粘合剂将外置套管与颅骨及内置套管粘紧。3)将凝固血匀速注入靶点(前囱前1mm,中线向左旁开3mm,深度为颅骨表面向下6mm)内,注射速度20uL/mino留针30min后拔除套管针。4)用自制大鼠脑组织切片模具将脑组织切成1mm厚冠状面薄片。大体观察血肿形态并照相。5)假手术组大鼠完成立体定向术及股动脉抽血,但不注血。1.3半暗带面积的测
7、定:1)各实验组大鼠术后分别饲养2h、3h、4h和6h时间,再次麻醉后断头取脑,立即用脑组织切片模具切取针道平面前后两片相邻脑片(厚度2mm)o2)针道前一片脑片浸泡在2%TTC内避光震荡孵育15min(37°C),置10%甲醛内避光浸泡固定过夜(4°C),TTC染色用来区分正常及缺血组织,将图像输入图像分析系统,计算缺血范围面积。3)针道后一片新鲜脑组织速冻后在针道相邻面进行冰冻切片,HE染色,光镜下即可辨认出坏死组织。输入图像分析系统,计算梗死灶面积。4)每只大鼠将缺血范围面积减去梗死灶
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