“鄞红”SSR亲本鉴定及大棚栽培特性研究【开题报告】

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1、毕业论文开题报告生物工程“鄞红”SSR亲本鉴定及大棚栽培特性研究1.课题研究意义及国内外研究现状1.1国内外研究现状目前,国内外已有许多人运用各种方法对葡萄种质资源进行了研究,如刘三军、孔庆山等人运用过氧化物同工酶分析法对我国的葡萄进行了研究,王跃进等人[4]用RAPD标记鉴定了圆叶葡萄和真葡萄亚属杂交的杂种,Sawazaki等人用同工酶分析法成功鉴定了欧洲葡萄和圆叶葡萄的杂种,Stavrakakis等人采用RAPD标记鉴定了希腊葡萄等等。由于分子生物学的发展,分子标记技术已在葡萄遗传学研究方面取得了显著

2、成果。分子生物技术中DNA指纹图谱的不断发展和完善,把种质资源的研究提高到了一个崭新水平(Vaneechoutle,1996),现已得到广泛应用。基于DNA水平的RFLP,RAPD,SSR,和AFLP等分子标记,由于不受环境条件及发育阶段等因素影响,先后在系统演变和品种鉴别中得到应用。但是在果树上,尤其是葡萄上应用甚少,亟待进一步加强研究和解决。1.2课题研究意义鉴于“鄞红”的外部性状与“巨峰”和“藤稔”都非常的相似,因此对“鄞红”、“巨峰”和“藤稔”葡萄进行进一步的鉴定,以确认亲缘关系;研究“鄞红”大棚

3、栽培特性,以确定大棚栽培优势。2.课题研究的主要内容、预期目标和研究方案2.1主要内容:以“藤稔”、“巨峰”葡萄品种和优良葡萄芽变株系“鄞红”为研究对象,进行DNA提取方法研究并进行DNA的SSR分析;分析大棚栽培特性。2.2预期目标:通过对“鄞红”、“巨峰”和“藤稔”三者的SSR分析,得出“鄞红”的亲本;通过对果实性状及特性的研究,了解大棚栽培葡萄的特性。2.3研究方案:采取处于生长期的“藤稔”、“巨锋”葡萄品种和优良葡萄芽变株系“鄞红”的幼叶,利用CTAB法和试剂盒法提取DNA,CTAB法中的材料分干

4、燥和未干燥良种进行提取,试剂盒法只使用经干燥的材料。用分光光度计和琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA进行检测,以选择提取率较好的方法。对提取的DNA采用PCR技术并进行SSR分析。对SSR分析结果进行对比,对3个葡萄品种的亲缘关系作初步鉴定。技术路线:“鄞红”、“巨峰”和“藤稔”亲缘关系鉴定及SSR分析:三个品种的DNA提取→筛选引物→PCR条件优化→SSR分析→得出遗传距离3.课题进度计划2010年6-8月,“鄞红”葡萄品种的采集;2010年7-9月,“鄞红”葡萄品种果实性状的研究;2010年8-11月“鄞

5、红”、“巨峰”和“藤稔”葡萄DNA提取;2010年10-12月,“鄞红”、“巨峰”和“藤稔”葡萄的SSR分析;2011年1月,整理、分析数据;2011年1-2月,撰写论文。4.参考文献[1]贺普超主编.葡萄学[M].中国农业出版社.1999,4:34.[2]王华,崔福君,张继澍,等.现代生物技术在葡萄种质资源!品种改良研究中的应用[J].中外葡萄与葡萄酒,2003,l:18,--21.[3]文fJ--军.我国野生葡萄分类研究阴.果树科学1995,12(4):224--227.[4]刘三军,孔庆山等.我国野

6、生葡萄过氧化物酶同工酶研究[J].果树科学1998,15(4):322~326.[5]马之胜,贺普超.用过氧化物酶同工酶对中国葡萄属野生种分类和亲缘关系的研究[J].华北农学报1998,13(2):122~126.[6]吴月燕,陶伟芳.葡萄离体培养及快速繁殖[J].浙江林学院学报,2001,18(2):188-192.[7]卢诚.浅谈葡萄的芽变选优[J].河北林业科技,2009(4):92-93.[8]SawazakiHE,PommerCV,PassosIR-da-S,etal.Identificatio

7、nofparentsandhybridsamongVitisviniferaandVitisrotundifoliausingisoenzymepolymorphismandRAPDmarker[J].Bragantia,1996,55(2):221-230.[9]王跃进,LamikanraO,SchellL,等.用RAPD分析鉴定葡萄属远缘杂种[J].西北农业大学学报,1997,25(3):16-20.[10]StanrakakisMN,BiniariK,HatzopoulosP.Identificat

8、ionanddiscriminationofeightGreekcultivars(VitisviniferaL.)byrandomamplifiedpolymorphicDNAmarkers[J].Vitis,1997,36(4):175-178.

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