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1、XX大学毕业论文HO・1mRNA在肺腺癌中的表达姓名：2014年6月25日HO-1mRNA在肺腺癌中的表达作者：戚振云鲍文华刘跃忠刘岩刘伟时【关键词】肺腺癌【摘要】目的探讨HO・1在肺腺癌组织中的表达状况。方法采用反转录一多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测27例单纯肺腺癌组及10例正常对照组织(距癌组织大约10cm)中HO・lniRNA表达水平。结果37例标本均进入半定量结果分析。肺癌组mRNA表达量(0.84±0.03),正常对照组HO・1mRNA表达量为(0.39±0.02),两组有显著性差异(PV0.05)。结论HO・1在肺腺癌屮
2、明显的高表达，为防治肺癌提供新思路。【关键词】肺腺癌;血红素氧合酶・1;逆转录■多聚酶链式反应HO-1mRNAexpressioninpulmonaryadenocarcinoma[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheexpressionofHO-1mRNAinpulmonaryadenocarcinoma.MethodsReversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR)wasusedtodetectHO-1mRNAexpressioninspecimen
3、sfrom27pulmonaryadenocarcinomaand10normaltissuesaroundthepulmonaryadenocarcinomaawayaboutlOcm.RcsultsAllthe37specimenswereinvolvedintheanalysisofhalfquantityresults・TherelativecontentsofHO-1mRNAwas(0.84±0.03)and(0・39±0.02)in27pulmonaryadenocarcinomaand10normaltissuesaround
4、thecancer.Significantdifferenceexistedbetweenthetwogroups.(P<0.05).ConclusionHO・1mRNAexpressioncontentwassignificantlyhigh.【Keywords】pulmonaryadenocarcinoma；hemeoxygenase-1；RT-PCR血红素氧合酶(hemeoxygenase?HO)是一种血红素降解的催化酶和限速酶，可将血红索分解成一氧化碳(carbonmonoxide,CO)胆红索和铁。已发现HO冇3种同工酶［1］,分
5、别为HO・1、H0-2及HO-3oH0-1在呼吸系统疾病屮已有广泛研究，而在肺腺癌实休中H0-1表达情况询未有文献报道。为探讨HO・1在人肺癌组织屮的表达状况，我们采用RT-PCR方法检测27例肺腺癌及正常组织屮HO-1mRNA的表达情况，结果报告如卜1资料与方法1.1病理资料肺腺癌组：选择2004〜2005年黑龙江省佳木斯市肿瘤结核医院肺癌手术标木，组织学诊断采用1981年WHO肺癌组织学分类标准。正常对照组:为肺腺癌手术患者中余10例无具他基础性疾病，在远离癌组织约10cm取肺组织。均为手术切除后立即取材，液氮冷冻。1.2引物序列及合成
6、HO・1引物依照文献［2］设计的序列，由北京奥科生物技术有限责任公司合成，引物序列如卜:上游引物：5'・CGGGCCAGCAACAAAGTG・3'；下游引物：5'・AGTGTAAGGACCCATCGGAGAA・3',扩增片段长度为107bPop-actin内参照引物，由北京奥科生物技术有限责任公司合成,上游弓I物:5'・TCCTCCCTGGAGAAGAGCTA・3',下游弓I物:5'・TCAGGAGGAGCAATGATCTTG・3',扩增的目的片段长度为302bp。1.3组织总RNA的抽提试剂合购自宝生物(大连)公司。取100mg冷冻保存的
7、组织标木，在液氮内研磨，取90mg加入已装好1mlTrizol的EP管屮，剧烈振荡，静置5min,用1ml针筒抽吸2次。加入200川氯仿，用力摇晃15s,静置2〜3min,12000r/min4°C离心15min,将上清移入另一EP管中,加入500皿异丙醇，静置10min,12000r/min4°C离心10min,弃上清，加入75%乙醇1ml洗RNA2次,7500r/min4°C离心5min,干燥RNA,加无RNA酶的水30(11在60°C孵育10min,琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量，紫外分光光用紫外/可见光分光光度计检测A260、A280
8、,确定RNA纯度及浓度。所有实验中的塑料制胡都经1%DEPC处理后高压灭菌。1.4逆转录一多聚酶链式反应（RT・PCR）取lpg总RNA进行逆转录反应,逆转录产物取5pl进行PC
