不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局研究

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1、不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局研究［摘要］目的：比较不同来源精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局。方法：回顾性的分析2008年1月-2011年12月在我中心行ICSI助孕的患者，选取不孕原因为单纯性严重少、弱、畸精症和无精症的，且年龄在35岁或35岁以下的153例患者入组本研究，共完成165个取卵周期，146个移植周期。按精于来源分为两组：射出精子组(严重少、弱、畸精症组)和睾丸精子组，比较两组间的女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn支数、Gn天数、HCG日E2值、内膜厚度、MII卵数、受精、卵裂、可移植胚胎、优质胚胎、临

2、床妊娠及流产情况。结果：两组间的女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn支数、Gn天数、HCG日E2值、子宫内膜厚度、MII卵数、2PN卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、流产率、多胎率无统计学差异；睾丸精子组的受精率、2PN受精率较射出精子组高(72.3%vs82.0%,P0.05)o结论:睾丸精子行Icsl助孕可以得到较好的临床结局，不比严重少、弱、畸精子症患者精液中的精子差。［关键词1ICSI；睾丸精子；严重少、弱、畸精症［基金项目］本项目由北京大学第一医院2011年院级青年基金资助。［第一作者简介］郃艳荣(1979-),助理研究

3、员、硕士研究生，主要从事辅助生殖技术专业研究。［通讯作者］徐阳,女，E-mail：xuyangm@126.com在不孕不育夫妇中，男性因素约占30%-50%,而无精症在男性不育人群中的发生率为10%-20%o1992年卵胞浆内单精子注射技术(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)的诞生给严重少、弱、畸精症的助孕治疗带来了突破。次年,Cref等首次利用睾丸精子行ICSI助孕获得成功，使得无精症的患者拥有遗传学后代成为可能。从此，ICSI成为男性不育患者的最主要的助孕技术，得到了不断的完善并广泛开展。睾丸精

4、子相对于精液中的精子数量少、活动力差、成熟度低，利用其行ICSI助孕的临床结局是否能与精液中的精子相媲美，一直倍受关注。现将北京大学第一医院生殖与遗传医疗中心近几年利用严重少、弱、畸精症患者精液中的精子和无精症患者的睾丸精子行ICSI助孕治疗的临床结局总结分析如下。1.资料与方法1.1研究对象回顾性的分析2008年1月-2011年12月在我中心行ICSI助孕的患者，选取不孕原因为单纯性严重少、弱、畸精症和无精症的，且年龄在35岁或35岁以下的153例患者人组本研究，共完成165个取卵周期，146个移植周期。所有ICSI助孕的患者在进入治

5、疗周期前均排除了染色体核型异常。所有患方夫妇均充分知情并签署知情同意书。1.2分组按精子的来源分为两组：射出精子组（严重少、弱、畸精子组）99例患者，完成104个取卵周期和90个移植周期,人选标准为：精子密度＜5X106/ml或A级+B级〈10%或正常精子形态率〈5%或回收前向运动精子总数＜1X106；睾丸精子组54例患者，完成61个取卵周期和56个移植周期，入选标准为：进入ICSI周期前完成了3次精液及尿液高速离心后镜检均未见精子，睾丸活检有精子。1.3方法1.3.1控制性超促排卵及卵子的获取超促排卵采用黄体中期启动的短效GnRH-a

6、长方案或月经周期第2天启动的长效GnRH-a长方案，当有22个优势卵泡的直径达到20mm时,注射绒毛膜促性腺激素（艾泽）250ug,36h后行阴道B超引导下穿刺取卵术。取卵后4-6h选取成熟卵子（MII期）行ICSIo1.3.2精子的准备1.3.2.1射出精子的准备患者于取卵前禁欲3〜7天，取卵当天手淫取精，采用离心沉淀法或微量密度梯度离心法处理精液，所有培养液采用Vitrolife培养体系。精子悬液放在室温中待用。1.3.2.2睾丸精子的准备采用睾丸精子抽吸术或行开放性切开睾丸组织取精方法取出曲细精管，方法见参考文献。曲细精管取出放在

7、培养液（spennrinse,美国Quinn's产品）中，分开曲细精管，清洗去除红细胞，然后用两只折弯了（角度为90度）的1ml注射器针头将精子从曲细精管中挤出至培养液中，去除挤压过的曲细精管，收集细胞悬液于离心管中。300g力离心5min,离心后去除大部分上清液，用培养液（Spermrinse美国Quinn's产品）3ml悬浮沉渣,300g力离心5min,去除大部分上清液，留取0.3〜0.5ml液体重新悬浮沉渣。精子悬液放在室温或培养箱中待用（若活动精子易找则室温放置，否则放在培养箱中培养）。1.3.3体外受精、培养、胚胎移植及妊娠情

8、况采用ICSI方法受精，所用培养体系为Vitrolife公司提供的G-IVF、Gl、G2系列。ICSI后16-20h、取卵后48h、72h分别观察受精和胚胎发育情况。优质胚胎的标准为：取卵后第3天胚胎卵裂球