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1、金樱子黄酮醇提技术优化探究摘要对金樱子黄酮醇提工艺进行研究，采用单因素试验考察提取时间、温度、料液比对黄酮提取率的影响。通过正交试验设计确定醇提法提取金樱子总黄酮的最佳提取条件，结果表明：时间为4h,温度为50°C,乙醇浓度60%,料液比1：20,在此条件下金樱子黄酮提取率可达4.855%O关键词金樱子；黄酮；醇提技术；优化中图分类号TS201.1文献标识码A文章编号1007-5739(2012)10-0339-01金樱子(RosalaevigataMichx.)又名鸡头子、糖罐子等，为蔷薇科蔷薇属多年生野
2、生植物，攀援状常绿灌木。果实中含有包括人体8种必需氨基酸在内的19种氨基酸及多糖、黄酮等生理活性物质［1］。随着学术界对黄酮与人类健康关系研究的深入，金樱子黄酮的研究受到空前重视。该文探究了具有成本低、污染少、易操作等优点的金樱子黄酮醇提法，旨在优化金樱子黄酮醇提技术，确定其最佳提取条件。1材料与方法1.1试验材料1.1.1仪器。UV-1240型分光光度计(日本岛津仪器设备有限公司)，HH24数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)，数显恒温空气浴振荡器，GL220G2II高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂），F
3、A1004电子天平（上海精科天平仪器有限公司）,101AS22型不锈钢数显电热鼓风干燥箱（上海浦东跃欣科学仪器厂），高速中药粉碎机（广东佛山顺德良友机械厂）等。1.1.2试剂与原料。98%芦丁标准品（上海沪宇生物科技有限公司）；90%乙醇（长沙红星试剂有限公司）；其余浓度乙醇（自配）；金樱子成熟果实（采自娄底市万宝镇）。1.2试验方法技术路线：金樱子f干燥一粉碎一脱脂一醇提一离心f离心液合并一定容测定吸光度。与标准曲线比较计算黄酮提取质量比。1.2.1标准曲线制备。准确称取芦丁标准品10mg置于25mL容量
4、瓶中，加90%乙醇溶解，定容，准确吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL分别置于10mL容量瓶中；加10%亚硝酸钠0.1mL,放置6min；再加5%硝酸铝0.5mL,放置6min,加5%氢氧化钠4mL,补纯净水至刻度，摇匀，静置6min；以510nm处测得的吸光度（Y）对浓度（x）作回归，绘制标准曲线。1.2.2样品测定。分别将待测黄酮各样品液定量稀释4倍后，再准确吸取各稀释液适量于10mL容量瓶中，照标准曲线制定项下方法操作，测定吸收度，由回归方程求出稀释液中总黄酮浓度，然后计算百分含量［2-
5、3］o1.2.3回流温度影响试验。取18份金樱子粉末，每份10g,分别置于250mL锥形瓶中，按固液比1：20加入50%乙醇。平分为3组置于水浴温度20、30、40、50、60、70°C,转速为120r/min的恒温水浴振荡器中浸提5h,提取液过滤后按1.2.1方法测定并计算提取比例［4］。1.2.4浸提时间影响试验。取12份已干燥金樱子粉末,每份10g,分别置于250mL锥形瓶中，以固液比1：20加入60%乙醇，平分为3组在温度50°C、转速为120r/min的恒温空气浴振荡器中分别浸提2、3、4、5h,
6、提取液过滤后按1.2.1方法测定吸光度并计算提取比例。1.2.5固液比影响试验。取12份干燥金樱子粉末，每份5g,分别置于250mL锥形瓶中，平分为4组,分别按1:10、1：20、1：30、1：40加入60%乙醇，将其都置于温度50°C、120r/min的恒温空气浴振荡器中浸提4h,提取液过滤后按1.2.1方法测定吸光度并计算提取比例［5-6］o1.2.6正交试验。依据单因素试验结果，参考相关文献资料，利用正交试验表设计浸提温度、时间、料液比、乙醇浓度4种因素在3个水平对金樱子中黄酮类物质提取效果的影响试验
7、。2结果与分析2.1标准曲线与回归方程标准曲线如图1所示，回归方程：Y=0.010lx-0.0006,R2=0.9996o在0~40ug/mL的浓度范围内，芦丁浓度与吸光度有良好的线性关系。2.2回流温度的影响在乙醇浓度50%、固液比1：20,回流温度为20、30、40、50、60、70°C时，样品中黄酮提取比例依次为2.01%、2.64%、3.95%、3.88%、3.79%、3.46%,当温度从20°C升高至40°C时，提取率提高96.5%,此时温度继续升高时，提取液中的黄酮含量几乎不变甚至降低。因此，可
8、以初步断定40匸左右时提取效果较好，温度过高可能破坏某些黄酮类化合物。2.3浸提时间影响金樱子以固液比为1：20、60%乙醇从中提取黄酮类物质，结果表明浸提3h的提取效果达4.19%。往后随着时间增加，提取率不升反降，这可能与浸提时间太长有关，某些黄酮类化合物可能被破坏。2.4固液比影响用60%乙醇在50°C空气浴振荡器中振荡浸提4h,固液比1：10、1：20、1：30、1:40,测定提取比例，结果表明乙醇与金樱
