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时间:2019-11-22
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1、第四章基本组织实验1观察四种基本组织【目的要求】1.联系机能观察了解四种基本组织的结构待点及分布.2.学习体腔膜或肠系膜平铺片的制作方法。3.学习疏松结缔组织新鲜材料平铺片的制件方法及活体染色方法•【材料与器械】III蜡蛛或蛙■大白鼠或小白鼠•解剖器一套(手术剪、解剖针■眼科辍〉、注射器及针头、一次性剌血针、滴管、脱脂棉、载玻片、盖玻片、显微镜、75%酒稱、1%硝酸银水溶液、1%台盼蓝生理盐水溶液、瑞特染液■甘油、蒸馆水、H-E染色切片C小肠纵横切.气蒼、目状腺、食管、膀洗、跟BL淋巴结、肠系膜、坐骨神经纵横切人骨磨片、铁苏木精染色骨骼肌纵横切片和心室肌切片.脊18灰质涂片(Nis
2、sl染色)、脊価横切片(Cajal银染色〉■坐骨神经纵切片(银染色)、人皮肤切片(银染色)■大脑皮质切片《Golgi或Cox法人各种电镜图片。【实验步象】1.上皮组织<1)单层扁平上皮1)蜡蛛或蛙体腔膜或肠系膜平铺片的制作和规察将蟾蛛或蛙双毁18处死•取体腔膜或肠系膜放于载玻片上•以解剖针将其挑开展平■稍晾干)加1%硝酸银水溶液数満于标木上,将标本炭盖;立即放在日光下晒3〜5min(或在日光灯下照10-15nun)$至标本变为浅褐色时,倾去载玻片上的溶液,用蒸馆水抚净,加上1〜2滴甘油•盖上盖玻片■即可用于显微镜观察。低倍镜下选择染成淡黄色、标本最薄部分进行观察I高倍镜下观察体腔膜
3、或肠系膜的间皮细胞以及肠系膜内毛细血管的内皮细胞,注意细胞的形态、细胞边界以及细胞核的位置、形态和颜色°2)肠•气管或其他器官切片(H-E染色)的观察低倍镜下寻找一个毛细血背橫切面或纵切面•观察了解单层舄平上皮在切面上的形态$高倍镜下观察胞质的颜色、胞核的形态和颜色。(2〉单层立才上皮取甲状腺切片(H-E央色)观寢•首先用低倍镜在切片上找到大小不等、内冒红色胶状物质的甲状腺滤泡■再用高倍镜規察细胞质的顏色、细胞核的颜色.形态和位置。(3)单层拄状上皮取小肠切片(H-E染色)观熱首先用低倍镜在切片上分辨出黏膜层,观察黏膜面形我的突人管腔的指状突起■再用高倍镜观察指状突起上柱状细胞和杯
4、状细胞的形态、颜色以及胞核的位置和形态;将显微镜的虹彩光圈缩小•械少光*•可见柱状细胞游离面有一层较亮的粉红色质状结构■即纹状缘.(4)假复展幷毛柱状上皮取气管切片(H・E染色)观察■首先用低借镜在切片上分辨出黏膜层•观察黏膜面上皮细胞的排列情况;再用高倍镇观察区分基细胞、梭形细胞、柱状细胞利杯状细胞I注意细胞形态■胞核位置以及游离面结构.(5)复层扁平上皮取食管切片(H-E染色〉观察未角化复层扃平上皮•首先用低借镜在切片上分辨岀黏膜层,观察新骐面复层扁平上皮的细息排列情况:再用高倍镜现察不同层次细挺的形态及据核的形态。(6)变移上皮取膀洗切片(H-E染色)观察上皮形杰特点•比较其
5、与复层扁平上皮的区别。(7)上皮细胞的特珠结枸用小肠上皮细胞纵切的透射电撓图片或小肠黏膜的扫描电镜图片观察小肠上皮细胞游离面伸岀的细小的指状突起,即微绒毛。用气仔上皮细胞的纵、横切的透射电廉图片现察上皮细胞游离面伸出的纤毛。用小肠上皮细胞纵切的透射电镜图片观察细胞与细胞之间的紧密连接、中间连接、桥粒和縫際连接.2・结缔组织(1)就松结締组织1)疏松结缔组织活休染色标本的制作与现察取小白鼠(或大白鼠)一只.皮下注射1%台盼蓝生理盐水涪液少许,刃〜ftOmin后■颈權脱臼法处死。剪开皮肤•在注射处附近剪取一小块皮下錯缔组织,置于载玻片上。双手各持一鮮剖针将组织挑开平铺于载玻片上.待标本
6、稍干后,如1〜2滴甘油,證上盖踱片即可观察。低倍镜下区分白色透明的胶原纤维和浅黄色较细的弹性纤维.高倍镜下根据细胞的形状.胞核的形状和染色、胞质内的頼粒等区别多突起扁平状的成纤维细胞和形状不规则、胞质内含有蓝色颗粒的巨噬细胞。2)肥大细胞的观察以小白鼠(或大白鼠)为材料,取少许皮下结缔组织制成平铺片。充分晾干后滴加瑞特染液(瑞特染料0>lg溶于60mL甲醇中)•使染二・.•液将材料完全淹没。染1min后,逐滴加等量蒸您水,与染液混合均匀。静置5〜10min后■倾去染液■用自来水洗净,待干后■不经封固即可镜检。先用低倍镜在平铺片的血管边缘找到成堆分布的肥大细胞•换用高倍镜观察.注意细
7、膾和胞核的形杰以及胞质内的红紫或蓝紫色颗粒。有时可见肥大细胞的脱颗粒现象。3)疏松结缔组织切片的观察取气管切片(H・E染色人低借镜下在上皮的深层找到染色略浅的疏松结缔组织。高倍镜下观察纤维和细据的形态•观察上皮形态特点,比较其与复层扁平上皮的区别。有时可见卵圆形的浆细胞■该细胞胞核位于细胞-•侧•柬色质呈辐射状排列•胞质近核处有一浅染区域。4)疏松结缔组织电镜图片的观察用扫描电镜和透射电镜图片分别观察区分胶原纤维、成纤维细胞和巨噬细胞。(2)致密结第组织取跟腰纵切片(
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