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时间:2019-11-22
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1、4/特异性检验的解释血浆生化的基本原理血浆基本上就是流动的细胞外液,内含用来保持水分的蛋白(通过提高渗透压)。它把大量的物质从吸收部位或生成部位运输到利用部位或分泌部位,并含有许多其它的物质,这些物质对维持细胞外液正常功能所需的精确浓度是十分重要的。因此,对血浆样品的分析可以提供各种类型的信息。血浆生化结果的解释真正对于每一种成分是特异的,但其内含有一些必须遵循的基本原理。在第一次接触到生化时,对它们的理解是很有帮助的,而且当要尽力搞清楚有疑问的或异常的结果时特别有用。首先要搞清楚的是某一特定物质存在于血浆中的原因。它的主要作用就要存于血浆中的(白蛋白,电解质)?还是正被运往需要它的地
2、方的(葡萄糖,激素)?或是正在排泄过程中的代谢产物(尿素,肌酉干,胆红素)?还是偶尔存在于血浆屮的物质(大多数的酶)?其次是考虑该物质是从哪里来的,要到哪里去一…换句话说,就是它进入血浆和从血浆中消除的机制,包括正常和异常的,并且它们是怎样调控的?从这里不难找出异常浓度可能的原因。异常浓度降低可能是由于进入血浆中的量减少(合成的损伤,营养缺乏,吸收不良,缺乏前体等)或血浆中的清除加快(需要量的增加,排泄量的增加,病理性丢失等)。异常浓度升高可能是由于进入血浆的量增加(生成和摄入的增加,从细胞内compartment中病理性漏岀)或血浆中清除减慢(利用减少,排泄损伤等)。同时,在一些病例
3、中还要记得正常的体液平衡机制干扰的影响。这似乎是很复杂的,但经过训练后,其思路就变得机械了。用其基木原理来解释尽可能多的病例是熟练掌握它的最好的方法,特别是关于记住上述的特异物质哪些是理论上可能发生的,哪些是不可能发生的。这里讨论的血浆的成分是那些常规使用中最常用的。述有许多其它的可用于特异性诊断的检验(如激素化验),但这些方法的详细讲述更适于那些与特异性临床疾病相关的课木。血清和血浆?当含有抗凝剂的血样被离心后,血浆就是上清液,而血清是血样凝固后的上清液。一般来说,大多数的生化检验都可用血清或肝素抗凝的血浆进行……除了它本身的需要外很少有特殊的例外。如今,肝素抗凝的血比凝固的血被更广
4、泛应用,这是因为它更容易操作的原因…它可以毫不耽误时间地进行离心,并很容易spinsdowno凝固的样品必须在室温下静置2小时以使凝血形成(这对于十分紧急的病例是不利的,且还会使一些酶恶化),而且分离也是十分麻烦的。除非使用(昂贵的)玻璃收集试管,否则样品必须离心两次,这样引起的结果是血清比血浆更容易引起溶血。血浆的唯一的问题是在电冰箱中贮存时它会形成微小的凝血块,但这通常不是主要的问题。那些倡导常规使用血清的抱怨肝素管太贵,但许多实验室确实提出过这个问题,并宁愿采用凝血过程。还有一些建议是血清是比较自然的,因为它里面没有添加剂。但肝素是精心选择的抗凝剂,因为它不影响目前使用的常规生化
5、化验方法。实际上,血浆是更自然的,因为这是真实存在于病畜的循环中的-…没有动物真正有任何的血清浓度,除非它患弥漫性血管内凝血!但在使用时,最重要的是要知道它们的区分,当样品是血浆吋不要说成血清浓度,反之亦然。血浆蛋白正常的总蛋白大约为60・80g/l(犬的稍低)。正常的白蛋白约为25-35g/l伏和猫的比大动物低)。血浆含有蛋白的混合物--白蛋片,球蛋白(免疫球蛋白和其它的蛋白被泛泛概括为此类),酶,特异的转运蛋口(例如铁传递蛋口),蛋口质激素和凝血因子。由于它们的种类不同,所以无法给出摩尔浓度。大多数都在肝脏中由氨基酸合成而来。它们都有特异的功能,但作为一类物质,它们都有维持渗透压的
6、功能。但只有最大的蛋白才被完全局限在血流中。还存在蛋白的副循环(特别是白蛋白),它离开毛细血管后进入组织液中,并通过淋巴冋到血流。总蛋口通常用缩二腺法來测定,但紧急时折光法也是很有用的。蛋口成分的分离首先是测定白蛋白的量,然后用总蛋白的量减去白蛋白的量来得到球蛋白的量。这种方法快速且便宜,但卡介苗dye-binding白蛋白法有时不稳定,并且易受干扰,实验室间的差别是值得考虑的。硫酸锌混浊(ZST)检验是一个粗糙的但测定血浆免疫蛋白水平又是相当有效的方法。它用于评估新生畜是否已消化和吸收了足够初乳,且只能用于小于一周的动物。其下限通常为15arbitraryZST单位,小于该值的小牛被
7、认为初乳不足。更多的信息可以通过电泳来获得。蛋白成分可在pH为8.4的聚丙烯酰胺凝胶上分离。干燥的和染色的凝胶体可在显像密度计上产生可观察的典型的电泳带。这与正常的该种类的模式相对比,并可见一些异常的典型模式:这些中的一些例子已例于表4.1中。在这些蛋口中,被认为是急性阶段的蛋口是急性炎症的标志。它们相关的重耍性随种类的不同而不同,但最重要的是u广抗胰岛素,a1■酸性糖蛋白,C•反应蛋白,a2■巨球蛋白,caeruk)plasmin(a2),结
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