微生物实验室操作指导

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1、微生物实验室操作指导书目录(-)安全守则(-)检验总则(三)基本技术要求(四)食品平板菌落计数(五)食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法(六)沙门氏菌检验(七)金黄色葡萄球菌检验(八)霉菌计数(九)革兰氏染色(十)空气中微生物的检验(H^一)水中微生物的检验(十二)食品接触面的微生物检验(十三)蔬菜农残的快速检测审核:编制:(-)安全守则1进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。2在进行高压、干燥、消毒等工作吋,工作人员不得擅自离开现场,认真观察温度、吋间,蒸镭易挥发、易燃液体吋,不准宜接加热,应置水浴锅

2、上进行。3严禁用口直接吸取药品和菌液,按无菌操作进行,如发生菌液、病原体溅出容器外吋,应立即用有效消毒剂进行彻底消毒,安全处理后方能离开现场。4工作完毕,两手用清水肥皂洗净,必耍吋可用(杀菌剂)新洁尔灭、过氧乙酸液浸泡手,然后用水冲洗,工作服应经常清洗,保持整洁,必要吋高压消毒。5实验完毕,及时清理现场和实验用具,对染菌带毒物品,进行消毒灭菌处理,并填写仃常工作记录。6每日卜•班,认真检杳水、相关电源是否关闭和止在使用的设备运转是否止常,并认真记录。下班前关好门窗,方可离去。(二)检验总则1主题内容与适用范围木

3、文规定了微生物检验一般规则。木文适用于食品中微生物学检验的采样、检验及结果报告。2样品的采集2.1采样口的确保采集的样品能代衣全部被检验的物质,使检验分析更具代衣性。2.2采样原则2.2.1采集的样品要有代表性,采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查,检查是否有污染源存在,同时能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。2.2.2应设法保持样品原有微生物状况,在进行检验前不得污染,不发生变化。2.2.3采样必须遵循无菌操作程,容器必须灭菌,避免环境屮微生物污染,容器不

4、得使用煤酚皂溶液,新洁尔灭、酒精等消毒物灭菌,更不能含有此类消毒药物,以避免杀掉样品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可使用。2.3采样数量取样数量的确定,应考虑分析项目的要求、分析方法的要求及被检物的均匀程度三个因索。样品应一式三份,分别供检验、复检及备查使用,每份样品数量一般不少于200go根据不同种类采样数量略有不同,实验室检验样品一般为25克。2.4采样方法2.4.1采取随机抽样的方式。2.4.2直接食用的小包装食品,尽可能取原包装,直到检验前不要开封,以防污染。2.4.3如为非冷藏易腐食品,应迅

5、速将所采样品冷却至0—4°C。2.4.4不要使样詁过度潮湿,以防食詁屮固有的细菌增殖。2.4.5在将冷冻食品送到实验室前,要始终保持样品处于冷冻状态。样甜一旦融化,不可使其再冻,保持冷却即可。2.5样品的保存和运送2.5.1样品采集完后,应迅速送往实验室检验,送检过程屮一般不超过3h,如路程较远,可保存在1—5°C环境屮,如需冷冻者,则在冷冻状态下送检。2.5.2冷冻样品应存放在一15°C以下冰箱内;冷却和易腐食品应存放在0—5°C冰箱或冷却库内;其它食品可放在常温冷暗处。2.5.3运送冷冻和易腐食詁应在包装容

6、器内加适量的冷却剂或冷冻剂。保证途屮样品不升温或不融化。2.5.4待检样品存放时间一般不应超过36小时。3检验样品的制备3.1样詁的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。3.2检验冷冻样品前应先使其融化。可在0—4°C融化,时间不超过18小吋,也可在温度不超过45°C的环境中融化,吋间不超过15分钟。3.3检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀。如容器已装满,叮迅速翻转25次;如未装满,可于7s内以30cm的幅度摇动25次。从混样到检验间隔时间不应超过3分钟。3.4开启样品包装前,先将表面擦干净,然后用75%乙醇消

7、毒开启部位及其周围。3.5非粘性液体样品可用吸管吸取一定量,然后加入适量的稀释液或培养基内,吸管插入样品内的深度不应超过2.5cm,也不得将吸有样品的吸管浸入稀释液或培养基内。3.6粘性液体样品可用灭菌容器称取一定量,然后加入适量的稀释液或培养基。3.7固体或半固体样品可用灭菌的均质杯称取一定量,再加适量的稀释液或培养基进行均质,从样品的均质到稀释和接种,相隔时间不应超过15分钟。4检验4.1实验室收到样品后,首先进行外观检验,及时按照国家标准检验方法进行检验,检验过程中要认真、负责,严格进行无菌操作,避免环境

8、中微生物污染。4.2检验所使用的稀释液、试剂、培养基接触的一切器皿必须经过有效的灭菌。4.3实验室所用仪器、设备的性能应定期检查和校正。4.4制备试剂和培养基所用的水,应为无离子水或用玻璃器血蒸傭的蒸傭水。4.5检验结束后,所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快灭菌和洗刷。清洗过的器IH1•不应残留洗涤剂的痕迹。5检验记录和结果的报告5.1经检验的每份样詁都应有完整的检验记录。样

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