沈四维毕业论文

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1、上洛大辱SHANGHAIUNIVERSITY华业设计(论丈丿UNDERGRADUATEPROJECT(THESIS)题曰:四种核酸染料在琼脂糖凝胶电泳中染色特性的比较分析学院专业学号学生姓名指导教师起讫日期生命科学学院生物工程09123303沈四维华子义02-25〜-06-04毕业设计(论文)任务书指导教师华子义课题名称四种核酸染料在琼脂糖凝胶电泳中染色特性的比较分析作业期限2月25日起6月4曰I上接受单位学生姓名学号所在专业上浴犬学二0年月日(一)课题来源、意义与主要内容:(注明自拟、科研、科技服务类别及任务提出单位)课题来源:生产实践意义与主要内容:核酸电

2、泳作为分离、纯化、鉴别核酸的重要方法,是分子生物学的核心技术之一。核酸电泳常用澡化乙锭(EB)作染料。但EB具有成本高、毒性强、强致突变性、环境污染严重等缺点。本实验旨在通过将3种新型染料分别用于电泳染色,与传统染料EB对比,找出既染色效果好,又毒性小,不具致突变性的核酸染料,以期能替代EB成为实验用的普通染料。(二)目的要求和主要技术指标:实验将选用新型染料GenGreenxGelRed.SYBRGreenI,以及传统染料EB,分别在缓冲液TAE和TBE中进行电泳,进行灵敏度、染色效果等方面的对比。各方综合,选出最佳染料,确保改进后的方法不仅经济实用、操作简

3、便、条带清晰、定量灵敏,而且毒性低,更好地确保操作人员的健康和周围环境的安全。(三)进度计划:2-25~3-5查阅文献资料。3-6~3-8预实验,确定入DNA的浓度梯度。3-9~3-29以TAE为缓冲液,分别以4种染料染色,电泳。M交染法、泡染法)4-1~4-30以TBE为缓冲液,分别以4种染料染色,电泳。(胶染法、泡染法)5-1〜6-4写论文,准备答辩。(四)主要文献、资料和参考书:《EB、银染和SYBRGreenI在DNA显示中的比较》《琼脂糖凝胶电泳常见问题的分析》《核酸染料的应用研究课题》《3中核酸染料应用于细菌脉冲场凝胶电泳染色的比较分析》《EB和S

4、YBRGreenI染色方法的比较》(五)审批意见:系(教研室)负责人20年月日(六)学生意见:学生签名:20年月日(七)课题变动情况:负责人:20年月日(八)注意事项:1.本任务书一式三份。(一)、(二)、(三)、(四)各项一般应在毕业作业开始前二周由指导教师认真填写,经系(教研室)负责人审查批准后,一份留系备查,一份由指导教师保存,一份下达给学生。2.学生应在导师指导下,根据本任务书的要求具体制订实施计划,并积极完成任务。1.课题内容如有变动,需经所属系或接受单位负责人同意。上浴大學毕业设计(论文)开题报告学院生命科学专业生物工程学号09123303姓名沈四

5、维华子义指导教师日期二O13年3月1日课题名称课题来源(课题的立题依据及研究意义)生产实践课题背景及意义近年来分子生物学得到了迅速发展,聚合酶链式反应(PCR)是公认的一种简便、准确的核酸定量检测技术。核酸电泳作为分离、纯化、鉴别核酸的重要方法,是分子生物学的核心技术之一。然而,它所能检测的极限及精确度依赖于现实DNA的染色方法。核酸电泳常用漂化乙锭(EB)作染料。EB能使凝胶中的DNA合RNA很好得着色,但EB具有成本高、毒性强、强致突变性、环境污染严重等缺点。本实验旨在通过将3种新型染料分别用于电泳染色,与传统染料EB对比,找出既染色效果好,又毒性小,不具

6、致突变性的核酸染料,以期能替代EB成为实验用的普通染料。(课题研究领域的发展现状及可能的发展方向)课题研究现状及发展趋势现在研究者正在不断研究推出既染色效果好,又不具有致突变性的核酸染料,以期能替代EB成为实验用的普通染料,从而减少由EB染色带来的环境污染。如:GoldView.GelRed.GenGreen.SYBRGreenI等。其中,GoIdView的灵敏度与EB相当,使用方法与EB相同,而毒性低于EB。SYBRGreenI的灵敏度为EB的十倍,使用方法与EB相同,且几乎无毒,不具有致突变性,可用于凝胶中的核酸染色,也可用于对细胞中的核酸染色,但价格比较

7、昂贵。该领域可能的发展方向是:EB将被逐渐替代,甚至淘汰。将有经济实用、操作简便、条带清晰、定量灵敏、相关性好、样品用量少、时间成本低、而且更好地保障工作人员的健康和周围环境安全的染料,并形成标准化操作方案。三、研究内容及研究目标(对研究的内容进行说明,并阐明要达到的目标)实验将选用新型染料GenGreen.GelRed.SYBRGreenI,以及传统染料EB,分别在缓冲液TAE和TBE中进行电泳,进行灵敏度、染色效果等方面的对比。各方综合,选出最佳染料,确保改进后的方法不仅经济实用、操作简便、条带清晰、定量灵敏,而且毒性低,更好地确保操作人员的健康和周围环境

8、的安全。四预计的研究难点(课题研究过程

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