设计培养基制备的实验方案

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1、设计培养基制备的实验方案春季传染病原菌设计培养基的的理由传染病是由病原微生物引起的具有传染性的一组疾病’是一组常见病，多发病，常可迅速传播，造成流行，严重危害人民的健康。每一种传染病都有它特异的病原体。病原体主要分为细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体、螺旋体、原虫、蠕虫等。培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。培养制备的实验方案一、目的1•了解并掌握培养基的配制、分装方法2.掌握各种实验室灭菌方法及技术。二、

2、原理1•培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能另、一定的氧花还原电佥芨合适场渗炭庄。2.琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98〜100°C下融化，于45°C以下凝固。但多次反复融化，其凝固性降低。3•任何一种培养

3、基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。三、材料1•器皿及材料天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液管及移液管筒、培养皿及培养皿盒、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、酒精灯、棉花、线绳、牛皮纸或报纸、纱布、乳胶管、电炉、灭菌锅、干燥箱。2■药品试剂蛋白月东、牛肉膏、NaCI、K2HPO4、琼脂、NaN03、KCI、MgS04、FeS04、蔗糖、麦芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽计、磷酸鞍、5%NaOH溶液、5%HCI溶

4、液。四、流程称药品-溶解-调PH值―融化琼脂-过滤分装-包扎标记T灭菌T摆斜面或倒平板。五、步骤1■称量药品根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。蛋白月东极易吸潮，故称量时要迅逮。2・溶解用量筒取一定量（约占总量的1/2）蒸惚水倒入烧杯中，在放看石楠网的电炉上小Jdra热，并用破庫搅拌，以防液彳*溢出。待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。如果配方中有淀粉，则先将淀粉用少量冷水调成糊状，并在火上加热搅拌，然后加足水分及其它原料，待完全溶化后，补足水分。3.调节pH根据培养基对pH

5、的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。测定pH可用pH试纸或酸度计等。4.溶化琼脂固体或半固体培养基须加入一定量琼脂。琼脂加入后，置电炉上…面搅拌…面加热，直至琼脂完全融化后才能停止搅拌，并补足水分（水需预热）。注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。5过滤分装先将过滤装置安装好。如果是液体培养基，玻璃漏斗中放…层滤纸，如果是固体或半固体培养基，则需在漏斗中放多层纱布，或两层纱布夹」层薄薄的脱脂棉趁热进行过滤。过滤后立即进行分装。分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口，以免浸湿棉塞，引起污染。液体分装高度以

6、试管高度的1/4左右为宜。固体分装装量为管高的1/5,半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜；分装三角瓶，其装量以不超过三角瓶容积的一半为宜。6■包扎标记培养基分装后加好棉塞或试管帽，再包上一层防潮纸，用棉绳系好。在包装纸上标明培养基名称，制备组别和%生生、日期等。