中医证候学与蛋白组学探析

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1、中医证候学与蛋白组学探析中医证候学与蛋白组学探析1蛋白质组学的概述蛋白质组学和功能蛋白质组学随着蛋白质组的提出，蛋白质组学也自然而然地孕育产生。但目前，蛋白质组学仍无明确的定义。一般认为它是研究蛋白质组或应用大规模蛋白质分离和识别技术研究蛋白质组的一门学科，是对基因组所表达的整套蛋白质的分析。现阶段，蛋白质组学研究的内容不仅包括对各种蛋白质的识别和定量化，还包括确定它们的细胞内外的定位、修饰、相互反应、活性，和最终确定它们的功能。并对由此获取的数据进行数据库构建，以及不可或缺的推动这一学科进步的蛋白质组分析技术研究。由于对全部蛋白质

2、的研究是非常困难的。所以中国的科学工作者提出了一种全新的研究策略:功能蛋白质组学。它是位于对个别蛋白质的传统蛋白质研究和以全部蛋白质为研究对象的蛋白质组研究之间的层次。研究特定时间、特定环境和试验条件下基因组所表达的蛋白质。2屮医证候的现代研究方法“证”是生命物质在疾病过程中具有时相性的本质的反映，“候”的原意是说明事物变化的性状，在医学范畴是指病变的临床表现。“证候”说明了中医学是通过观察病人的异常表现来把握疾病本质的。证具有整体性、定型性定系性、制约制、时相性，可以概括反映疾病发生的原因和病机、部位和范围；反映邪正相争的态势、

3、病变的性质、类型和机能异常。证候是在致病因素作用下。机体内外环境各系统之间相互关系发生紊乱所产生的综合反应。是反映疾病处于某一阶段病因、病性、病位、病势等病理要索的综合性诊断概念。而证候的多态性是指在目前所认为的某一最基本的证型中包含着若干可分辨的有意义的不同病理状态网。中医的“病”是以中医理论为指导,有其自身的特点和理论体系，每一个病都有各种不同的临床特征，各个不同疾病的发生发展。变化转归等一整套理论体系。屮医的病与证是密切联系的。病统辖证，证从属于病，一病可以见数证，某一证候可以见于数病。临床上，一般先了解病人的各种临床症状，舌

4、脉表现，判断疾病的证候，使用相应的方药进行治疗。辨病与辨证是用药的前提，没有正确的疾病诊断和辨证分型，就无法正确地进行治疗。目前，中医证候学研究方法有：（1）多学科多层次多因素分析法。该法是借用数学模型达到辨证的计量目的。（2）在宏观辨证的基础上，用现代医学的方法，寻找证的客观指标，探讨其木质，即用微观指标认识与辨证。（3）主次症状判断法，根据中医的现证，用传统的辨证方法分析综合，通过临床实践，反复修改、完善，确定主次症状，制定辨证标准。（4）主症辨证法，主症通常是诊断该证必须依靠的特征症状或非特异性症状的特意组合，在证中起决定和主

5、导作用，而次症只起补充和参考作用，此法在辨证屮将复杂的辨证条理化、简明化、系统化。中医重视疾病某阶段机体的整体状态。传统中医学对疾病的认识侧重于整体、宏观、司外揣内，通过疾病表现在外的征象推测演绎疾病的病因、病性、病位。归纳出证的概念。证候是致病因子与体质因素相互作用的综合反应，这种综合反应的过程具有一定的物质基础，用现代科技手段和方法來揭示其物质基础并进行定量和定性对证候及辨证的规范化具有十分重要的意义。中医界早年致力于探索证候的高特异性和高灵敏性的指标，试图建立证候实验诊断单个金指标，然而，由于证的整体性、动态性和杲病同证，同病

6、异证等特征，不可能用单一指标作定性、定量、定位的说明。据此，脏腑证候客观化研究采用综合指标，精选非特异指标进行特异组合，建立能反映证本质并能区别他证的定性、定量、定位综合实验指标，辅助四诊，确定证候诊断。3利用蛋白质组学研究中医证候的设想笔者认为，就分了水平而言，证候不一，基因表达谱也不一样，“证”的本质是基因型及其表达，体外能用肉眼观察到的症状和体征变化具有其分子基础，是基因及其在mRNA、蛋白质水平差异的外在表现。结合临床辨证分型。我们提出证候基因组学、证候蛋口质组学理论，提倡通过分子流行病学调查，综合mRNA、蛋白质等多种分子

7、生物学标志物，引入分子生物学方法、蛋口质组学方法，如niRNA差异显示法、差异二维蛋白质电泳方法，从mRNA、蛋白质水平探讨中医“证”的实质、证的分类、证的辨治、证的演变规律，阐明证的基因表型、蛋口质表形及其转化。蛋口质组学研究基因的最终表达产物一具有活性的蛋口质，以蛋口质双向电泳和新型质谱分析为技术平台,研究不同条件和状态下蛋口质组的性质和变化规律，是后基因组吋代的研究重点。其代表方法为二维聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过引入两个纬度两个完全独立的物化参数，经过两次垂直方向的分离，含多种蛋白质的样品展开成为有近千个蛋白点的繁星图，利用计算

8、机数字图象处理系统和大型统计分析软件，对不同疾病或不同证候与对照样品的蛋白质进行比较，寻找具有统计学意义和丰度差异的蛋口点，并根据测得的蛋白质及氨基酸的实验数据，到网上蛋白质组基因组数据库中,利用生物信息的方法进行比较研究。在理论上、