HLA―A抗原在喉癌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

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1、HLA-A抗原在喉癌鳞状细胞癌中的表达及临床意义HLA-A抗原在喉癌鳞状细胞癌中的表达及临床意义摘要：目的检测人类白细胞抗原-A抗原(HLA-A)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和流式细胞术,观察20例止常喉组织和58例喉鳞状细胞癌组织中HLA-A抗原的表达,并结合患者的临床病理资料对其结果进行分析。结果①HLA-A抗原在后鳞状细胞癌和正常喉组织中的阳性表达率分别为72.4%(42/58),100%(20/20),二者之间差异有统计学意义。(P<0.01)o②HLA-A抗原在

2、各级喉鳞状细胞癌中均有表达，且表达的阳性率随喉癌分化程度的下降而下降，在不同病理分级之间的阳性率有显著性差异(卩〈0・05),IL与淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)o③喉鳞状细胞癌组与正常喉组织组HLA-A抗原的平均荧光指数分别为(x±s)(4.53土0.85)和(&24土1.30),两组比较具有显著性差异(P<0.01)o结论HLA-A抗原可能作为喉鳞状细胞癌发生，发展不同时期的一个标志物，并对判断喉鳞状细胞癌的预后有一定的价值，为临床诊断治疗提供一定的理论依据。关键词：喉肿瘤癌；鳞状细胞

3、；HLA-A抗原；免疫组化技术；流式细胞术喉癌是仅次丁•肺癌的第二大呼吸道高发癌，目前在我国的发病率有逐渐走高的趋势。多种治疗方法的综合应用已使患者的生存率和生活质量大大提高，但喉癌的复发和转移等问题常使治疗效果不佳，术后颈部淋巴结转移仍是患者致死的主要原因［1］。人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen,HLA),其编码基因位于第6号染色体短臂(6p21,31),是一组具有高度多态性，紧密连锁的基因群，它分别表达HLA-I,II,III类抗原分子，HLA-A抗原是经典的I类抗原之

4、一，具有高度多态性，广泛分布于有核细胞的表而，其主要生物学功能是参与内源性抗原的提呈和交叉提呈外源性抗原，激发特异性免疫应答反应。近年来肿瘤免疫学研究发现，许多肿瘤的HLA-A抗原表达降低或缺失，致杀伤性T细胞对肿瘤细胞不能识别，肿瘤细胞得以逃避宿主的免疫攻击，从而不利于肿瘤的临床治疗和T细胞免疫疗法的预后。为进一步研究证实HLA-A抗原的表达情况及其与临床病理学及预后等的相关性，木组采用免疫组织化学法染色技术，检测了HLA-A抗原在各级鳞状细胞癌中的表达水平，并对其与临床病理特征Z间的关系进行了分

5、析，旨在探讨此种抗原在喉癌的表达特点及其与临床病理特征的关系，为临床诊断及治疗提供一定的理论指导。1资料与方法1.1一般资料58例标木取自沈阳市第一人民医院2011年3月〜2013年3月，手术切除并经病理证实为喉鳞癌，术前均未行化疗及放射治疗，术后立即将肿瘤组织包埋于OCT组织冻存液屮，迅速用液氮处理后，于-80°C冻存，备免疫组化检测，其中男48例，女10例，年龄38〜76岁,中位年龄60岁；依照国际抗癌协会TNM分期标准分期，I-II期23例,III-IV期35例;声门上型25例，声门型33例，

6、组织病理学分级，高分化32例，中分化15例，低分化11例；其中15例有颈部淋巴结转移，术后经病理检测得到证实。同时取20例喉部正常组织做对照（对照组取自喉全切除术，均经病理证实为正常喉组织）。另取喉鳞状细胞组织及正常喉组织标本各8例，备流式细胞检查。1.2结果判定1.2.1免疫组化的结果判定标准HLA-A抗原阳性主要表达在细胞膜，呈棕褐色或棕黄色，胞浆亦有淡染。按Mattern等提出的标准，从两方面进行半定量评分：①按染色细胞的百分比评分：无阳性细胞为0分，阳性细胞〈25%为1,阳性细胞25%〜50

7、%为2分，阳性细胞＞50%为3分。②按染色细胞强度评分：无显色为0分，浅棕黄色为1分,棕黄色为2分，棕褐色为3分。③将这两方面评分和加计总分（0〜6分），〉2分为阳性表达，W2分为阴性表达。1.2.2HLA-A染色灰度的测定利用IBASII图像分析系统，检测免疫组化染色阳性的各组标本中的IILA-A抗原的相对含量，每组检测5张切片。被测样品先光学显微镜成像，随机选5个测量视野，由电视机摄像后，被测细胞呈像余彩色监视器上，并输入计算机处理，计算被测细胞的灰度值。灰度值范围为0〜255,其中0代表灰度最

8、深，255代表灰度最浅。1.2.3流式细胞术结果观察按照Morkve等提出的荧光指数(fluorescenceindex,FI)表示HLA-A抗原表达的相对含量。公式如下：FI二瘤细胞表达的平均荧光强度/正常对照样品平均荧光强度。1・3统计学处理运用统计软件SPSS11.5进行t检验，x2检验，Fisher精确计算。2结果2.1免疫组化结果1.1.1HLA-A抗原在喉鳞状细胞癌和止常喉组织中的表达情况在喉癌组和对照组屮HLA-A抗原阳性表达率分别为72.4%(42/5