药学职称论文：地龙药材蛋白质电泳鉴定的初步研究

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1、药学职称论文：地龙药材蛋白质电泳鉴定的初步研究资料提供者：上海论文网地龙药材蛋门质电泳鉴定的初步研究摘要：冃的探讨聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对地龙药材进行鉴别的对行性，为地龙的品种鉴定以及药材品质评价提供参考依据。方法采用聚内烯酰胺凝胶电泳技术，对不同來源、不同品种，不同加工方法的地龙药材进行对溶性蛋白质电泳研究。结果电泳图谱屮广地龙在14.4KDa分了量Z间存在5条清晰、稳定的条带,可初步认定其为广地龙的特征鉴别条带。不同品种的地龙在蛋白质电泳图谱谱型和谱带的强弱、蛋口质相对含量上均有一•定的差异;地龙鲜品和干品在蛋白质谱带的强弱上有一定差异

2、。结论聚丙烯酰胺电泳方法可以用于不同品种地龙的鉴定以及品质评价。关键词:地龙;聚丙烯酰胺凝胶电泳；品种鉴定；品质评价地龙又名蚯蚓，是我国常用传统中药，为钳蚓科动物参环毛蚓Pheretimaasperg订lum(E.Perrier)>通俗环毛蚓Pheretimavulgaris(Chen)、威廉环毛蚓Pheretimaguillelmi(Michaelson)和栉盲环毛蚓Pheretimapectinifera(Michaelsen)的干燥体。前1种习称“广地龙冶，后3种习称“沪地龙冶［1］。具有清热定惊、通络平喘、利尿等功效，临床应用广泛［

3、2］。自然界蚯蚓的品种繁多，目前我国已记载的有300多种［3］;各地医家作为线用的地龙在分类学上就有3科4属49种Z多［4］。由于地龙來源十分复杂,故其品种质量一直接影响到临床用药安全。但国内外对地龙的研究主要集屮在生药学性状的比较鉴别［5］、冇效成分的捉取分离［6］、药理与临床［7］等方面，而冇关品种鉴别方面研究较少。当前地龙夯材标准中也缺少特升性强、行Z有效的鉴定方法，如地龙原动物品种的性状鉴别，耍求必须是性成熟的个体，而对丁幼体或经过多道工序炮制加工后的地龙药材则难辨真伪［5］o鉴于地龙体内主要含蛋门质脂肪等大分子成分［6］,木研究探

4、索利用擅长分离鉴定蛋门质混合物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSWPAGE)技术［8-9］，对不同来源地龙及地龙不同炮制品的蛋白质差界进行比较研究，为完善地龙药材质量标准提供实验依据，同时也为其它动物类中药的鉴定捉供方法学的参考。1•仪器、材料与试剂1・1.材料分别收集自各地的10批地龙药材干品，以及3批不同品种的地龙原动物鲜品，经广州屮医药人学屮药鉴定学教研室李薇教授进行形态鉴别分类，材料编号、品名及來源等见表1。表1.样品信息表Table1.Informationofsamples编号名称批号产地购买地或采集地拉丁名1地龙20080701广东

5、广东国药医药连锁企业有限公司Ph.aspergillum(E.Perrier)2地龙20090801广西康乐医药商店Ph.aspergillum(E.Perrier)3地龙20090721广东广州市海王星辰连锁冇限公司天河区分店Ph.aspcrgillum(E.Perrier)4地龙20090909广西广东兴和堂药业连锁有限公司Ph.aspergillum(E.Perrier)5地龙20090801广东广东大森林连锁药店有限公司Ph・aspergillum(E.Perrier)6地龙20090919广东广东济和堂药业连锁有限公司Ph.asp

6、ergil：lum(E.Perrier)7地龙20090521广东广东海王星辰连锁有限公司海珠区分店Ph.aspergillum(E.资料提供者：上海论文网Perrier)8地龙20090701广东康乐医药商店Ph.aspergillum(E.Perrier)9地龙20090526广西广州二天堂大药房连锁有限公司Ph.aspergillum(E.Perrier)10地龙20090501广东广州采芝林药业连锁店Ph.aspergillum(E.Perrier)11威廉环毛蚓20100427广东广州大学城Ph.guillelmiMichaels

7、en12栉盲环毛蚓20100427广东广州大学城Ph.pcctiniferaMichaelsen13三星环毛蚓20090701香港慈姑山Ph.Triastriata1.2.仪器SHIMADZU郵AUY120型电子分析天平(日本岛津)；DYY郵6C型凝胶电泳仪(北京六一仪器厂)，DYC2郵23A型垂玄电泳槽(北京六一仪器厂)；TG16郵W微量高速离心机(湘仪离心机仪器有限公司),1IK3300H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)，PIIS郵30酸度计(上海精密科学仪器有限公司)o1.3•试剂丙烯酰胺(Acr)、N,N郵甲叉双丙烯酰胺(B

8、is)、四甲基乙二胺(TEMED)、过硫酸胺(Ap)、三疑甲基胺基甲烷(Tris).甘氨酸、考马斯亮蓝R郵250、十二烷基礦酸钠(SDS)、低分子蛋白标准(6条带：14.4~97