血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：

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1、白细胞是无色有核的血细胞，在血液中一般呈球形，根据形态差异可分为颗粒和无颗粒两大类。颗粒白细胞（粒细胞）中含有特殊染色颗粒，用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞即嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；无颗粒白细胞包括单核细胞和淋巴细胞。人体内白细胞总数和种类白细胞的百分比是相对稳定的。正常人每立方毫米的血液时白细胞为止5000〜10000个。各种白细胞的百分比为：中性粒细胞50〜70%；嗜酸性粒细胞1〜4%；嗜好碱性粒细胞0〜1%；淋巴细胞20〜40%；单核细胞为1〜7%。机体发生炎症或其他疾病都可引起口细胞总数及各种口细胞的百分比发生变化，因此检查白细胞总数及白细胞分类计

2、数成为辅助诊断的一种重要方法。血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：（一）采样、制片及染色，三道工序至关重要：是细胞形态学检查的成败关键。要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求:米样、制片：玻片耍求：国内1・0mmX26mmX76mm±0.5,美国NCCLS规定1・0mmX25mmX75mm±0.5,要严格清洁，接近中性.推片：选择优质推片，推片两端边缘整齐、平滑。也可选用有机玻璃,其大小、厚度与坡片相同，两端之边缘应加工光滑，以利推片用。采外周血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小,具有一定推片技术，推片倾斜45°±,推成血膜长度25mm〜35mm

3、,宽度18〜20mm,血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少lOmm,血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。2.涂片染色：是识别细胞形态的重要标记工序：（1）常规瑞氏-姬姆萨染色要点：要得到满意、漂亮的血细胞涂片染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。染色液配制要合格；涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持玻片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（1

4、:2）,其量要充足、混均，染色时间要30分钟以上。（2）细胞着色的观察：当染液与缓冲液混合后，甲醛吸水液温升高，发生剧烈反应，直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布，随染色时间的推延，“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”，逐渐由外缘向内缘推进至染色面中心（此过程需要20-30分钟以上），则表明细胞着色已完成，再用自來水缓流冲洗，使染色液沉渣及染色粒浮去，使其充分起分色作用，去除细胞染色中浮色，显示出胞核结构及细胞清晰形态，待干,镜检。WBC形态学诊断技巧：1・WBC数值准确性估计：(1)目前自动化计数仪时有出现结果的偏差，低倍镜观察血涂片可以粗略估计WBC数值及分布。低倍视野

5、WBC数：正常约3〜5个，增多6个以上，减低3个以下。(1)WBC如推至片尾，分布不均，估计将有一定难度。较大的细胞如单核、异淋及中性粒细胞及不成熟细胞多在片尾，体部则多为较小的淋巴细胞，使分类造成偏差，所以分类部位在适当调整。2.白细胞计数值限度分级：(1)WBC正常范围:4.0^10.0X107L;(2)WBC正常限度以下：轻度减少«4.0~3.0X107L),中度减少«3.0~2.0X107D,极度减少«2.0X109/L);(3)WBC正常高限度以上：分轻度增多(>10.0〜20.0X107L),中度增多(>20.0〜40.0X107L),明显增多(>40.0-80.0

6、X109/L)极度增多(>80.0X107L)o以此与所测知WBC计数值作粗略对比，推断WBC计数值的准确性。(4)如在血片分类计数过程中发现较多有核红细胞时，计出血片中有核红所占%率，即以校正原WBC计数值减去有核红所占比例，求出外周血中WBC总数值，另作WBC分类计100个过程中遇到多少有核红细胞，即有核红细胞个/100个WBC,或作血片有核细胞分类计数(包括有核红细胞)，计出有核红细胞所占%率。2.WBC分类正常范围及其病理性改变：(1)WBC分类正常范围:新牛儿出牛后最初24小吋口细胞数高，主要为中性粒细胞，至第3〜4周，中性粒细胞与淋巴细胞比例倒转，直至4岁淋巴细胞比

7、例仍多。见表一表1正常成人白细胞分类范围：%有绝对值/109L中性粒细胞40〜752.8〜7.5X109淋巴细胞20〜501.5〜3.5X109单核细胞2〜100.2〜0.8X109嗜酸性粒细胞1〜60.04〜0.4X109嗜碱性粒细胞<10.015〜0.1X109病理性形态学改变：%1中性粒细胞中性粒细胞分叶分化程度，核仅一叶或二叶，其百分率增加时谓之“左移”，反之，多数细胞四叶以上谓之右移，一般认为正常中性粒细胞胞核分叶情况：--2叶者为20〜40%1叶者为〈5%—>5叶以上者提示有巨幼